יסודות המיקרוסקופ
מחשבון שדה ראייה למיקרוסקופ
חשבו מה רוחבו של העיגול שאתם רואים בעינית, העבירו שדה שנמדד בהגדלה נמוכה להגדלה גבוהה, מצאו את השטח שמצלמה קולטת, והעריכו את גודלו של תא לפי מספר התאים שנכנסים לרוחב השדה.
הנוסחה לשדה הראייה
קוטר שדה הראייה = מספר השדה ÷ (הגדלת העדשה האובייקטיבית × הגדלת עדשת העזר)
מספר השדה (FN) הוא הקוטר, ב-mm, של צמצם השדה של העינית, ולעיתים קרובות הוא חרוט על העינית אחרי ההגדלה (למשל "10×/22"). MicroscopyU מציין טווח כולל של 6 עד 28 mm, ו-16 עד 18 mm כערך טיפוסי לעינית של 10×; מיקרוסקופי מחקר משתמשים לעיתים קרובות ב-22 mm או יותר. הגדלת העינית עצמה לא מופיעה בנוסחה, כי מספר השדה כבר מתאר את מה שהעינית מראה.
דוגמה מחושבת: FN 22 עם עדשה אובייקטיבית של 40×: 22 ÷ 40 = 0.55 mm, כלומר 550 µm. עם עדשה של 10×: 2.2 mm.
שדה הראייה בהגדלה גבוהה מתוך הגדלה נמוכה
במעבדת הוראה בדרך כלל מודדים את השדה פעם אחת בהגדלה נמוכה, בעזרת סרגל שקוף או מיקרומטר שולחן, ומחשבים את השאר. קוטר השדה משתנה ביחס הפוך להגדלה הכוללת:
FOV(גבוהה) = FOV(נמוכה) × הגדלה(נמוכה) ÷ הגדלה(גבוהה)
דוגמה מחושבת: 4.5 mm (4500 µm) בהגדלה כוללת של 40×. בהגדלה כוללת של 400×: 4500 × 40 ÷ 400 = 450 µm. אם בערך 10 תאים נכנסים לרוחב השדה הזה, כל תא הוא בערך 45 µm.
שדה הראייה של מצלמת מיקרוסקופ
מצלמה רואה מלבן, לא את העיגול של העינית. גודלו בדגימה הוא גודל החיישן חלקי ההגדלה שבין הדגימה לחיישן (עדשה אובייקטיבית × מתאם מצלמה):
רוחב השדה = מספר הפיקסלים לרוחב × גודל הפיקסל של המצלמה ÷ (עדשה אובייקטיבית × מתאם)
דוגמה מחושבת: מצלמת sCMOS של 2048 × 2048 עם פיקסלים של 6.5 µm, על עדשה אובייקטיבית של 20× ומתאם של 1×: 2048 × 6.5 ÷ 20 = 666 µm בכל צלע, ב-0.325 µm לפיקסל. קובץ מהמיקרוסקופ רושם בדרך כלל את גודל הפיקסל הזה במטא-נתונים שלו, וכך מציגים מציירים פס קנה מידה נכון.
שאלות
איך מחשבים את שדה הראייה של מיקרוסקופ?
חלקו את מספר השדה של העינית (mm) בהגדלת העדשה האובייקטיבית. מספר שדה של 20 עם עדשה אובייקטיבית של 10× נותן שדה ראייה של 2 mm; עם עדשה של 40×, 0.5 mm.
איפה מוצאים את מספר השדה?
הוא חרוט על העינית אחרי ההגדלה, למשל "10×/20" או "WF10×/22". אם הוא לא מופיע, מדדו את השדה בהגדלה נמוכה בעזרת מיקרומטר שולחן או סרגל שקוף.
איך מוצאים את שדה הראייה בהגדלה גבוהה?
הכפילו את קוטר השדה בהגדלה הנמוכה בהגדלה הנמוכה, וחלקו בהגדלה הגבוהה. 4.5 mm ב-40× הופכים ל-4.5 × 40 ÷ 400 = 0.45 mm ב-400×.
איך מעריכים גודל תא מתוך שדה הראייה?
ספרו כמה תאים ייכנסו לאורך קוטר השדה וחלקו: שדה של 450 µm שמכיל כ-10 תאים מקצה לקצה פירושו שכל תא הוא בערך 45 µm.
האם המחשבון הזה חינמי?
כן. הוא רץ בדפדפן שלכם ולא שולח דבר לשום מקום. SlideScope, אפליקציית המיקרוסקופיה למחשב של אותו צוות, היא אפליקציה בתשלום עם ספריית דוגמאות חינמית (כל הכלים) ומנוי לתמונות שלכם.
מקורות
התוצאות תיאורטיות או חשבוניות; בדקו אותן מול התיעוד של המכשיר שלכם לפני שתסתמכו עליהן בעבודה קלינית או מפוקחת.
מדדו על התמונות האמיתיות שלכם
SlideScope פותח 34 פורמטים של מיקרוסקופים וסורקי שקופיות, ביניהם CZI, ND2, SVS ו-LIF, עם הכיול שלהם, כך שאורכים, שטחים, ספירות תאים ופסי קנה מידה מתקבלים ב-µm בלי להגדיר דבר. נסו כל כלי בחינם על הדוגמאות המובנות; כדי לפתוח את התמונות שלכם נדרש מנוי. כבר החלטתם? הירשמו למנוי עכשיו.