Basi del microscopio

Calcolatore del campo visivo del microscopio

Calcola quanto è largo il cerchio che vedi nell’oculare, riporta un campo misurato dal basso all’alto ingrandimento, trova l’area acquisita da una fotocamera e stima la dimensione di una cellula da quante ne entrano nel diametro del campo.

Calcolatore del campo visivo

Campo visivo nell’oculare

Diametro del campo visivo—
In mm—
Area del campo—

Dal basso all’alto ingrandimento

Diametro del campo ad alto ingrandimento—

Campo acquisito da una fotocamera

Campo visivo sul campione—
Dimensione del pixel sul campione—

Stimare la dimensione di una cellula dal campo

Dimensione approssimativa di una cellula—

La formula del campo visivo

Diametro FOV = numero di campo ÷ (ingrandimento dell’obiettivo × ingrandimento della lente ausiliaria)

Il numero di campo (FN) è il diametro, in mm, del diaframma di campo dell’oculare, ed è spesso inciso sull’oculare dopo l’ingrandimento (ad esempio "10×/22"). MicroscopyU indica da 6 a 28 mm come intervallo complessivo e da 16 a 18 mm come valore tipico per un oculare 10×; i microscopi da ricerca usano spesso 22 mm o più. L’ingrandimento dell’oculare in sé non compare nella formula, perché il numero di campo descrive già ciò che l’oculare mostra.

Esempio svolto: FN 22 con un obiettivo 40×: 22 ÷ 40 = 0,55 mm, cioè 550 µm. Con un obiettivo 10×: 2,2 mm.

Campo visivo ad alto ingrandimento a partire dal basso ingrandimento

Nei laboratori didattici di solito si misura il campo una volta a basso ingrandimento, con un righello trasparente o un micrometro oggetto, e si calcola il resto. Il diametro del campo è inversamente proporzionale all’ingrandimento totale:

FOV(alto) = FOV(basso) × ingrandimento(basso) ÷ ingrandimento(alto)

Esempio svolto: 4,5 mm (4500 µm) a 40× totali. A 400× totali: 4500 × 40 ÷ 400 = 450 µm. Se in quel campo entrano circa 10 cellule in fila, ogni cellula misura circa 45 µm.

Campo visivo di una fotocamera per microscopio

Una fotocamera vede un rettangolo, non il cerchio dell’oculare. La sua dimensione sul campione è la dimensione del sensore divisa per l’ingrandimento tra campione e sensore (obiettivo × adattatore per fotocamera):

larghezza del campo = pixel in larghezza × dimensione del pixel della fotocamera ÷ (obiettivo × adattatore)

Esempio svolto: una fotocamera sCMOS 2048 × 2048 con pixel da 6,5 µm su un obiettivo 20× e un adattatore 1×: 2048 × 6,5 ÷ 20 = 666 µm per lato, a 0,325 µm per pixel. Un file proveniente dal microscopio di solito registra questa dimensione del pixel nei metadati, ed è così che i visualizzatori disegnano una barra di scala corretta.

Domande

Come si calcola il campo visivo di un microscopio?

Dividi il numero di campo dell’oculare (mm) per l’ingrandimento dell’obiettivo. Un numero di campo di 20 con un obiettivo 10× dà un campo visivo di 2 mm; con un obiettivo 40×, 0,5 mm.

Dove trovo il numero di campo?

È inciso sull’oculare dopo l’ingrandimento, ad esempio "10×/20" o "WF10×/22". Se manca, misura il campo a basso ingrandimento con un micrometro oggetto o un righello trasparente.

Come si trova il campo visivo ad alto ingrandimento?

Moltiplica il diametro del campo a basso ingrandimento per l’ingrandimento basso e dividi per l’ingrandimento alto. 4,5 mm a 40× diventano 4,5 × 40 ÷ 400 = 0,45 mm a 400×.

Come stimo la dimensione di una cellula dal campo visivo?

Conta quante cellule entrerebbero lungo il diametro del campo e dividi: un campo di 450 µm che contiene circa 10 cellule in fila significa che ogni cellula misura circa 45 µm.

Questo calcolatore è gratuito?

Sì. Funziona nel tuo browser e non invia nulla da nessuna parte. SlideScope, l’app desktop per microscopia creata dallo stesso team, è un’app a pagamento con una libreria di campioni gratuita (tutti gli strumenti) e un abbonamento per le tue immagini.

Fonti

I risultati sono teorici o aritmetici; confrontali con la documentazione del tuo strumento prima di farvi affidamento per attività cliniche o regolamentate.

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