顯微鏡基礎

顯微鏡視野計算器

算出您在目鏡中看到的圓形視野有多寬、將低倍下量得的視野換算到高倍、求出相機拍攝的範圍,並依視野中橫向可排下幾個細胞來估計細胞大小。

視野計算器

目鏡中的視野

視野直徑—
以 mm 表示—
視野面積—

從低倍換算到高倍

高倍下的視野直徑—

相機拍攝的視野

樣本處的視野—
樣本上的像素尺寸—

由視野估計細胞大小

單一細胞的約略大小—

視野公式

視野直徑 = 視野數 ÷(物鏡倍率 × 輔助透鏡倍率)

視野數(FN)是目鏡視野光闌的直徑(以 mm 為單位),通常刻印在目鏡上倍率之後(例如「10×/22」)。MicroscopyU 指出整體範圍為 6 到 28 mm,10× 目鏡的典型值為 16 到 18 mm;研究用顯微鏡常使用 22 mm 以上。目鏡倍率本身不會出現在公式中,因為視野數已經描述了目鏡所呈現的範圍。

計算範例:FN 22 搭配 40× 物鏡:22 ÷ 40 = 0.55 mm,即 550 µm。搭配 10× 物鏡:2.2 mm。

由低倍視野求高倍視野

在課堂實驗中,通常只在低倍下用透明尺或載物台測微尺量測一次視野,其餘則用計算求得。視野直徑與總放大倍率成反比:

視野(高倍)= 視野(低倍)× 放大倍率(低倍)÷ 放大倍率(高倍)

計算範例:總放大倍率 40× 時為 4.5 mm(4500 µm)。總放大倍率 400× 時:4500 × 40 ÷ 400 = 450 µm。若該視野中橫向大約可排下 10 個細胞,每個細胞約為 45 µm。

顯微鏡相機的視野

相機看到的是矩形,而不是目鏡中的圓形。它在樣本處的大小,等於感測器尺寸除以樣本到感測器之間的放大倍率(物鏡 × 相機轉接鏡):

視野寬度 = 橫向像素數 × 相機像素尺寸 ÷(物鏡 × 轉接鏡)

計算範例:像素為 6.5 µm 的 2048 × 2048 sCMOS 相機,搭配 20× 物鏡與 1× 轉接鏡:2048 × 6.5 ÷ 20 = 每邊 666 µm,每像素 0.325 µm。顯微鏡產生的檔案通常會在中繼資料中記錄這個像素尺寸,檢視器正是據此繪製正確的比例尺。

常見問題

如何計算顯微鏡的視野?

將目鏡的視野數(mm)除以物鏡倍率。視野數 20 搭配 10× 物鏡,視野為 2 mm;搭配 40× 物鏡則為 0.5 mm。

在哪裡可以找到視野數?

它刻印在目鏡上倍率之後,例如「10×/20」或「WF10×/22」。如果沒有標示,請在低倍下用載物台測微尺或透明尺量測視野。

如何求出高倍下的視野?

將低倍視野直徑乘以低倍放大倍率,再除以高倍放大倍率。40× 下的 4.5 mm,在 400× 時變為 4.5 × 40 ÷ 400 = 0.45 mm。

如何由視野估計細胞大小?

計算視野直徑上橫向可排下幾個細胞,再相除:450 µm 的視野中頭尾相連大約可排下 10 個細胞,表示每個細胞約為 45 µm。

這個計算器是免費的嗎?

是的。它在您的瀏覽器中執行,不會將任何資料傳送到任何地方。SlideScope 是同一團隊開發的桌面顯微影像應用程式,為付費應用程式,附有免費範例庫(所有工具皆可使用),開啟您自己的影像則需要訂閱。

資料來源

結果為理論值或算術結果;用於臨床或受法規管制的工作之前,請先與儀器的說明文件核對。

在您的真實影像上量測

SlideScope 可開啟 34 種顯微鏡與玻片掃描器格式,包括 CZI、ND2、SVS 與 LIF,並沿用檔案本身的校正資訊,因此長度、面積、細胞計數與比例尺都直接以 µm 呈現,無需任何設定。可在內建範例上免費試用所有工具;開啟您自己的影像需要訂閱。已經決定了嗎?立即訂閱。

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