माइक्रोस्कोप की बुनियादी बातें
माइक्रोस्कोप फ़ील्ड ऑफ़ व्यू कैलकुलेटर
पता लगाएँ कि आइपीस में दिखने वाला गोला कितना चौड़ा है, लो पावर पर मापे गए फ़ील्ड को हाई पावर पर ले जाएँ, कैमरे द्वारा कैप्चर किया गया क्षेत्र निकालें, और फ़ील्ड में आर-पार कितनी कोशिकाएँ समाती हैं, उससे कोशिका के आकार का अनुमान लगाएँ।
फ़ील्ड ऑफ़ व्यू का सूत्र
FOV व्यास = फ़ील्ड नंबर ÷ (ऑब्जेक्टिव मैग्निफ़िकेशन × सहायक लेंस मैग्निफ़िकेशन)
फ़ील्ड नंबर (FN) आइपीस के फ़ील्ड स्टॉप का mm में व्यास है, और अक्सर आइपीस पर मैग्निफ़िकेशन के बाद खुदा होता है (उदाहरण के लिए "10×/22")। MicroscopyU के अनुसार कुल रेंज 6 से 28 mm है और 10× आइपीस के लिए 16 से 18 mm आम है; रिसर्च माइक्रोस्कोप अक्सर 22 mm या उससे ज़्यादा इस्तेमाल करते हैं। आइपीस का मैग्निफ़िकेशन ख़ुद सूत्र में नहीं आता, क्योंकि फ़ील्ड नंबर पहले से ही बताता है कि आइपीस क्या दिखाता है।
हल किया गया उदाहरण: FN 22 और 40× ऑब्जेक्टिव: 22 ÷ 40 = 0.55 mm, यानी 550 µm। 10× ऑब्जेक्टिव के साथ: 2.2 mm।
लो पावर से हाई पावर पर फ़ील्ड ऑफ़ व्यू
क्लास लैब में आप आम तौर पर फ़ील्ड को एक बार लो पावर पर, किसी पारदर्शी स्केल या स्टेज माइक्रोमीटर से मापते हैं, और बाकी की गणना करते हैं। फ़ील्ड व्यास कुल मैग्निफ़िकेशन के व्युत्क्रमानुपाती होता है:
FOV(हाई) = FOV(लो) × मैग्निफ़िकेशन(लो) ÷ मैग्निफ़िकेशन(हाई)
हल किया गया उदाहरण: 40× कुल पर 4.5 mm (4500 µm)। 400× कुल पर: 4500 × 40 ÷ 400 = 450 µm। अगर उस फ़ील्ड में आर-पार लगभग 10 कोशिकाएँ समाती हैं, तो हर कोशिका लगभग 45 µm की है।
माइक्रोस्कोप कैमरे का फ़ील्ड ऑफ़ व्यू
कैमरा आइपीस वाला गोला नहीं, बल्कि एक आयत देखता है। नमूने पर इसका आकार सेंसर के आकार को नमूने और सेंसर के बीच के मैग्निफ़िकेशन (ऑब्जेक्टिव × कैमरा एडैप्टर) से भाग देने पर मिलता है:
फ़ील्ड की चौड़ाई = आर-पार पिक्सेल × कैमरा पिक्सेल आकार ÷ (ऑब्जेक्टिव × एडैप्टर)
हल किया गया उदाहरण: 6.5 µm पिक्सेल वाला 2048 × 2048 sCMOS कैमरा, 20× ऑब्जेक्टिव और 1× एडैप्टर पर: 2048 × 6.5 ÷ 20 = हर तरफ़ 666 µm, 0.325 µm प्रति पिक्सेल पर। माइक्रोस्कोप से आई फ़ाइल आम तौर पर यह पिक्सेल आकार अपने मेटाडेटा में दर्ज करती है, और इसी से व्यूअर सही स्केल बार बनाते हैं।
प्रश्न
माइक्रोस्कोप का फ़ील्ड ऑफ़ व्यू कैसे निकालें?
आइपीस के फ़ील्ड नंबर (mm) को ऑब्जेक्टिव मैग्निफ़िकेशन से भाग दें। 10× ऑब्जेक्टिव के साथ 20 का फ़ील्ड नंबर 2 mm का फ़ील्ड ऑफ़ व्यू देता है; 40× ऑब्जेक्टिव के साथ, 0.5 mm।
फ़ील्ड नंबर कहाँ मिलेगा?
यह आइपीस पर मैग्निफ़िकेशन के बाद खुदा होता है, उदाहरण के लिए "10×/20" या "WF10×/22"। अगर यह न हो, तो लो पावर पर स्टेज माइक्रोमीटर या पारदर्शी स्केल से फ़ील्ड मापें।
हाई पावर पर फ़ील्ड ऑफ़ व्यू कैसे निकालें?
लो पावर के फ़ील्ड व्यास को लो पावर मैग्निफ़िकेशन से गुणा करें और हाई पावर मैग्निफ़िकेशन से भाग दें। 40× पर 4.5 mm, 400× पर 4.5 × 40 ÷ 400 = 0.45 mm हो जाता है।
फ़ील्ड ऑफ़ व्यू से कोशिका के आकार का अनुमान कैसे लगाएँ?
गिनें कि फ़ील्ड व्यास में आर-पार कितनी कोशिकाएँ समाएँगी और भाग दें: 450 µm के फ़ील्ड में अगर लगभग 10 कोशिकाएँ एक सिरे से दूसरे सिरे तक आती हैं, तो हर कोशिका लगभग 45 µm की है।
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स्रोत
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