Podstawy mikroskopii
Kalkulator pola widzenia mikroskopu
Oblicz, jak szeroki jest okrąg widoczny w okularze, przenieś zmierzone pole z małego na duże powiększenie, ustal obszar rejestrowany przez kamerę i oszacuj wielkość komórki na podstawie tego, ile komórek mieści się w poprzek pola.
Wzór na pole widzenia
Średnica FOV = numer pola ÷ (powiększenie obiektywu × powiększenie soczewki pośredniej)
Numer pola (FN) to średnica przysłony polowej okularu w mm, często wygrawerowana na okularze po powiększeniu (na przykład "10×/22"). MicroscopyU podaje 6–28 mm jako pełny zakres i 16–18 mm jako typowe wartości dla okularu 10×; mikroskopy badawcze często mają 22 mm lub więcej. Samo powiększenie okularu nie występuje we wzorze, ponieważ numer pola już opisuje to, co pokazuje okular.
Przykład: FN 22 z obiektywem 40×: 22 ÷ 40 = 0,55 mm, czyli 550 µm. Z obiektywem 10×: 2,2 mm.
Pole widzenia przy dużym powiększeniu na podstawie małego
Na zajęciach laboratoryjnych zwykle mierzy się pole raz, przy małym powiększeniu, przezroczystą linijką lub mikrometrem przedmiotowym, a resztę oblicza. Średnica pola zmienia się odwrotnie proporcjonalnie do powiększenia całkowitego:
FOV(duże) = FOV(małe) × powiększenie(małe) ÷ powiększenie(duże)
Przykład: 4,5 mm (4500 µm) przy powiększeniu całkowitym 40×. Przy powiększeniu całkowitym 400×: 4500 × 40 ÷ 400 = 450 µm. Jeśli w poprzek tego pola mieści się około 10 komórek, każda ma mniej więcej 45 µm.
Pole widzenia kamery mikroskopowej
Kamera widzi prostokąt, a nie okrąg okularu. Jego rozmiar w próbce to rozmiar matrycy podzielony przez powiększenie między próbką a matrycą (obiektyw × adapter kamery):
szerokość pola = liczba pikseli w poziomie × rozmiar piksela kamery ÷ (obiektyw × adapter)
Przykład: kamera sCMOS 2048 × 2048 z pikselami 6,5 µm na obiektywie 20× i adapterze 1×: 2048 × 6,5 ÷ 20 = 666 µm na każdy bok, przy 0,325 µm na piksel. Plik z mikroskopu zwykle zapisuje ten rozmiar piksela w metadanych i dzięki temu przeglądarki rysują poprawny pasek skali.
Pytania
Jak obliczyć pole widzenia mikroskopu?
Podziel numer pola okularu (mm) przez powiększenie obiektywu. Numer pola 20 z obiektywem 10× daje pole widzenia 2 mm; z obiektywem 40× 0,5 mm.
Gdzie znaleźć numer pola?
Jest wygrawerowany na okularze po powiększeniu, na przykład "10×/20" lub "WF10×/22". Jeśli go brakuje, zmierz pole przy małym powiększeniu mikrometrem przedmiotowym lub przezroczystą linijką.
Jak wyznaczyć pole widzenia przy dużym powiększeniu?
Pomnóż średnicę pola przy małym powiększeniu przez to małe powiększenie i podziel przez duże powiększenie. 4,5 mm przy 40× daje 4,5 × 40 ÷ 400 = 0,45 mm przy 400×.
Jak oszacować wielkość komórki na podstawie pola widzenia?
Policz, ile komórek zmieściłoby się na średnicy pola, i podziel: pole 450 µm, w którym mieści się około 10 komórek ułożonych jedna za drugą, oznacza, że każda komórka ma około 45 µm.
Czy ten kalkulator jest bezpłatny?
Tak. Działa w Twojej przeglądarce internetowej i nigdzie niczego nie wysyła. SlideScope, desktopowa aplikacja mikroskopowa tego samego zespołu, to płatna aplikacja z bezpłatną biblioteką przykładów (wszystkie narzędzia) i subskrypcją na własne obrazy.
Źródła
Wyniki są teoretyczne lub arytmetyczne; zanim oprzesz się na nich w pracy klinicznej lub regulowanej, sprawdź je w dokumentacji swojego przyrządu.
Mierz na swoich prawdziwych obrazach
SlideScope otwiera 34 formaty mikroskopów i skanerów preparatów, w tym CZI, ND2, SVS i LIF, z ich własną kalibracją, więc długości, pola powierzchni, liczby komórek i paski skali wychodzą w µm bez żadnej konfiguracji. Wypróbuj wszystkie narzędzia bezpłatnie na wbudowanych przykładach; do otwierania własnych obrazów potrzebna jest subskrypcja. Już zdecydowane? Subskrybuj teraz.