Mikroskop temelleri
Mikroskop görüş alanı hesaplayıcısı
Okülerde gördüğünüz dairenin ne kadar geniş olduğunu hesaplayın, düşük büyütmede ölçülen bir alanı yüksek büyütmeye taşıyın, bir kameranın yakaladığı alanı bulun ve alana kaç hücre sığdığından bir hücrenin boyutunu tahmin edin.
Görüş alanı formülü
FOV çapı = alan numarası ÷ (objektif büyütmesi × ara mercek büyütmesi)
Alan numarası (FN), okülerin alan diyaframının mm cinsinden çapıdır ve çoğu zaman okülerin üzerinde büyütmeden sonra kazılıdır (örneğin "10×/22"). MicroscopyU genel aralık olarak 6–28 mm, 10× bir oküler için tipik değer olarak 16–18 mm verir; araştırma mikroskopları çoğu zaman 22 mm veya daha fazlasını kullanır. Oküler büyütmesinin kendisi formülde yer almaz, çünkü alan numarası okülerin ne gösterdiğini zaten tanımlar.
Çözümlü örnek: 40× objektifle FN 22: 22 ÷ 40 = 0,55 mm, yani 550 µm. 10× objektifle: 2,2 mm.
Düşük büyütmeden yüksek büyütmede görüş alanı
Ders laboratuvarında alan genellikle bir kez, düşük büyütmede, şeffaf bir cetvel veya bir tabla mikrometresiyle ölçülür ve gerisi hesaplanır. Alan çapı toplam büyütmeyle ters orantılı olarak değişir:
FOV(yüksek) = FOV(düşük) × büyütme(düşük) ÷ büyütme(yüksek)
Çözümlü örnek: 40× toplam büyütmede 4,5 mm (4500 µm). 400× toplam büyütmede: 4500 × 40 ÷ 400 = 450 µm. Bu alan boyunca yaklaşık 10 hücre sığıyorsa her hücre kabaca 45 µm’dir.
Mikroskop kamerasının görüş alanı
Kamera oküler dairesini değil, bir dikdörtgeni görür. Bu dikdörtgenin numunedeki boyutu, sensör boyutunun numune ile sensör arasındaki büyütmeye (objektif × kamera adaptörü) bölünmesiyle bulunur:
alan genişliği = yatay piksel sayısı × kamera piksel boyutu ÷ (objektif × adaptör)
Çözümlü örnek: 20× objektif ve 1× adaptör üzerinde 6,5 µm piksellere sahip 2048 × 2048 bir sCMOS kamera: 2048 × 6,5 ÷ 20 = her kenarda 666 µm, piksel başına 0,325 µm. Mikroskoptan gelen bir dosya genellikle bu piksel boyutunu meta verilerine kaydeder; görüntüleyiciler doğru ölçek çubuğunu bu sayede çizer.
Sorular
Bir mikroskobun görüş alanı nasıl hesaplanır?
Oküler alan numarasını (mm) objektif büyütmesine bölün. 10× objektifle 20 alan numarası 2 mm görüş alanı verir; 40× objektifle 0,5 mm.
Alan numarasını nerede bulurum?
Okülerin üzerinde büyütmeden sonra kazılıdır, örneğin "10×/20" veya "WF10×/22". Yoksa alanı düşük büyütmede bir tabla mikrometresi veya şeffaf bir cetvelle ölçün.
Yüksek büyütmede görüş alanı nasıl bulunur?
Düşük büyütmedeki alan çapını düşük büyütmeyle çarpın ve yüksek büyütmeye bölün. 40×’te 4,5 mm, 400×’te 4,5 × 40 ÷ 400 = 0,45 mm olur.
Görüş alanından hücre boyutunu nasıl tahmin ederim?
Alan çapı boyunca kaç hücre sığacağını sayın ve bölün: uç uca yaklaşık 10 hücre alan 450 µm’lik bir alan, her hücrenin yaklaşık 45 µm olduğu anlamına gelir.
Bu hesaplayıcı ücretsiz mi?
Evet. Tarayıcınızda çalışır ve hiçbir yere bir şey göndermez. Aynı ekibin geliştirdiği masaüstü mikroskopi uygulaması SlideScope ise ücretsiz bir örnek kitaplığı (tüm araçlarla) ve kendi görüntüleriniz için abonelik sunan ücretli bir uygulamadır.
Kaynaklar
Sonuçlar kuramsal veya aritmetiktir; klinik ya da düzenlemeye tabi çalışmalarda bunlara güvenmeden önce cihazınızın belgeleriyle karşılaştırın.
Gerçek görüntüleriniz üzerinde ölçün
SlideScope, aralarında CZI, ND2, SVS ve LIF’in de bulunduğu 34 mikroskop ve slayt tarayıcı biçimini kendi kalibrasyonlarıyla açar; böylece uzunluklar, alanlar, hücre sayıları ve ölçek çubukları hiçbir ayar yapmadan µm cinsinden elde edilir. Tüm araçları yerleşik örneklerde ücretsiz deneyin; kendi görüntülerinizi açmak için abonelik gerekir. Kararınızı verdiniz mi? Hemen abone olun.