Kiến thức cơ bản về kính hiển vi
Máy tính trường nhìn kính hiển vi
Tính đường kính vòng tròn bạn thấy trong thị kính, chuyển một trường nhìn đã đo từ độ phóng đại thấp sang độ phóng đại cao, tìm vùng mà máy ảnh ghi lại, và ước tính kích thước tế bào từ số tế bào xếp vừa ngang trường nhìn.
Công thức trường nhìn
Đường kính FOV = số trường ÷ (độ phóng đại vật kính × độ phóng đại thấu kính phụ)
Số trường (FN) là đường kính, tính bằng mm, của chắn trường (field stop) trong thị kính, và thường được khắc trên thị kính sau độ phóng đại (ví dụ "10×/22"). MicroscopyU nêu khoảng chung là 6 đến 28 mm và 16 đến 18 mm là mức điển hình cho thị kính 10×; kính hiển vi nghiên cứu thường dùng 22 mm trở lên. Bản thân độ phóng đại thị kính không có mặt trong công thức, vì số trường đã mô tả những gì thị kính hiển thị.
Ví dụ: FN 22 với vật kính 40×: 22 ÷ 40 = 0,55 mm, tức 550 µm. Với vật kính 10×: 2,2 mm.
Trường nhìn ở độ phóng đại cao tính từ độ phóng đại thấp
Trong phòng thí nghiệm giảng dạy, bạn thường đo trường nhìn một lần ở độ phóng đại thấp, bằng thước trong suốt hoặc trắc vi vật kính (stage micrometer), rồi tính phần còn lại. Đường kính trường nhìn tỷ lệ nghịch với độ phóng đại tổng:
FOV(cao) = FOV(thấp) × độ phóng đại(thấp) ÷ độ phóng đại(cao)
Ví dụ: 4,5 mm (4500 µm) ở độ phóng đại tổng 40×. Ở độ phóng đại tổng 400×: 4500 × 40 ÷ 400 = 450 µm. Nếu khoảng 10 tế bào xếp vừa ngang trường nhìn đó, mỗi tế bào có kích thước khoảng 45 µm.
Trường nhìn của máy ảnh kính hiển vi
Máy ảnh nhìn thấy một hình chữ nhật, không phải vòng tròn của thị kính. Kích thước của nó tại mẫu bằng kích thước cảm biến chia cho độ phóng đại giữa mẫu và cảm biến (vật kính × bộ chuyển đổi máy ảnh):
chiều rộng trường nhìn = số điểm ảnh theo chiều ngang × kích thước điểm ảnh máy ảnh ÷ (vật kính × bộ chuyển đổi)
Ví dụ: máy ảnh sCMOS 2048 × 2048 với điểm ảnh 6,5 µm trên vật kính 20× và bộ chuyển đổi 1×: 2048 × 6,5 ÷ 20 = 666 µm mỗi cạnh, ở 0,325 µm mỗi điểm ảnh. Tệp từ kính hiển vi thường ghi kích thước điểm ảnh này trong siêu dữ liệu, nhờ đó các trình xem vẽ được thanh tỷ lệ chính xác.
Câu hỏi
Tính trường nhìn của kính hiển vi như thế nào?
Chia số trường của thị kính (mm) cho độ phóng đại vật kính. Số trường 20 với vật kính 10× cho trường nhìn 2 mm; với vật kính 40× là 0,5 mm.
Tìm số trường ở đâu?
Số trường được khắc trên thị kính sau độ phóng đại, ví dụ "10×/20" hoặc "WF10×/22". Nếu không có, hãy đo trường nhìn ở độ phóng đại thấp bằng trắc vi vật kính hoặc thước trong suốt.
Tìm trường nhìn ở độ phóng đại cao như thế nào?
Nhân đường kính trường nhìn ở độ phóng đại thấp với độ phóng đại thấp rồi chia cho độ phóng đại cao. 4,5 mm ở 40× trở thành 4,5 × 40 ÷ 400 = 0,45 mm ở 400×.
Ước tính kích thước tế bào từ trường nhìn như thế nào?
Đếm xem bao nhiêu tế bào xếp vừa ngang đường kính trường nhìn rồi chia: trường nhìn 450 µm chứa khoảng 10 tế bào nối tiếp nhau nghĩa là mỗi tế bào khoảng 45 µm.
Máy tính này có miễn phí không?
Có. Công cụ chạy trong trình duyệt của bạn và không gửi gì đi đâu cả. SlideScope, ứng dụng hiển vi trên máy tính do cùng đội ngũ phát triển, là ứng dụng trả phí có thư viện mẫu miễn phí (với mọi công cụ) và gói thuê bao cho ảnh của riêng bạn.
Nguồn
Kết quả mang tính lý thuyết hoặc số học; hãy đối chiếu với tài liệu của thiết bị trước khi dựa vào chúng cho công việc lâm sàng hoặc công việc chịu quản lý.
Đo trên ảnh thực của bạn
SlideScope mở 34 định dạng của kính hiển vi và máy quét tiêu bản, trong đó có CZI, ND2, SVS và LIF, với hiệu chuẩn riêng của từng tệp, nên chiều dài, diện tích, số đếm tế bào và thanh tỷ lệ đều ra theo µm mà không cần thiết lập gì. Dùng thử miễn phí mọi công cụ trên các mẫu tích hợp; để mở ảnh của riêng bạn, bạn cần một gói thuê bao. Đã quyết định? Đăng ký ngay.