Experimentos · desde SlideScope 1.22.0

Compara tratamientos en todo un experimento de microscopía

Organiza una carpeta de imágenes en tratamientos, muestras y réplicas. Aplica una misma receta de conteo o de puntuación de IHQ a todas las imágenes y luego compara los tratamientos con un gráfico de puntos, la media ± DE y la prueba estadística adecuada, con n contado en muestras, no en imágenes ni en células. Los valores atípicos y las réplicas discordantes pasan a una cola de revisión, y cada tabla, gráfico y párrafo de Métodos se exporta para tu artículo.

Tratamientos, muestras y réplicas Una receta en todas las imágenes n = muestras, no imágenes

Por qué comparar tratamientos a mano sale mal

Configuración distinta en cada imagen

Contar cada imagen por separado favorece pequeños cambios de umbral o de región de una imagen a otra, y la diferencia entre tratamientos puede deberse a la configuración y no a la biología.

n inflado

Tratar cada imagen, o cada célula, como una observación independiente hace que n sea mucho mayor que el número de animales o cultivos, y los valores p parecen más convincentes de lo que el experimento respalda.

Valores atípicos que nadie revisó

Un campo desenfocado o un pliegue en el tejido puede desplazar una muestra completa. En una hoja de cálculo llena de números, nada te lleva de vuelta a la imagen que lo causó.

Cómo funciona un experimento en SlideScope

  1. Abre la carpeta en SlideScope. Se abre como un conjunto de datos con todas las imágenes que contiene, en los formatos que lee SlideScope: CZI, ND2, SVS, NDPI, OME-TIFF, LIF y más.
  2. Organízala como un experimento. Asigna a cada imagen un tratamiento, una muestra y una réplica, importando una hoja de muestras o aceptando sugerencias basadas en los nombres de archivo. Excluye una imagen indicando el motivo: queda registrada y puedes recuperarla. El experimento es un archivo pequeño junto a tus imágenes, así que se mueve con la carpeta.
  3. Aplica una receta a todas las imágenes (Plus). La misma configuración de Quantify cuenta núcleos, células o partículas y puntúa DAB en cada imagen, así que cada número se obtuvo de la misma manera.
  4. Compara tratamientos (Plus). Elige una medición y SlideScope dibuja un punto por muestra, con la media y la DE de cada tratamiento, y ejecuta las pruebas correspondientes.
  5. Revisa y exporta. Abre cualquier imagen marcada desde la cola de revisión, corrige la clase o el grado de IHQ de un objeto y exporta las tablas de imágenes, muestras y grupos, el gráfico y un párrafo de Métodos.
Un conjunto de datos organizado en tratamientos con vehículo y con fármaco, con una muestra y una réplica para cada imagen y los botones Run recipe y Compare
Una carpeta organizada como experimento: 2 tratamientos, 6 muestras, 13 imágenes. Datos de ejemplo: recortes de IHQ de BrdU de EPFL (CC BY 4.0), con nombres de tratamientos y muestras inventados para la demostración.

La estadística, y por qué n es el número de muestras

Las imágenes y las células de un mismo animal, paciente o cultivo no son independientes. SlideScope primero promedia las imágenes de cada muestra y luego ejecuta las pruebas sobre un valor por muestra, así que n es el número de réplicas biológicas que realmente tienes.

TratamientosPruebas que ejecuta SlideScopeSe muestra con
DosPrueba t de Welch (sin suponer varianzas iguales) y U de Mann-Whitney (basada en rangos)Un gráfico de puntos con cada muestra, media ± DE y n por tratamiento
Tres o másANOVA de una vía y H de Kruskal-Wallis (basada en rangos)El mismo gráfico y la misma tabla para cada tratamiento

Puedes comparar cualquier valor que la receta haya producido para cada imagen: número de objetos, densidad por mm², porcentaje de positivos, H-score, puntuación de Allred, área media de los objetos o intensidad media por canal.

Un gráfico de puntos del porcentaje de núcleos positivos por muestra para vehículo y fármaco, n = 3 en cada uno, con los resultados de la prueba t de Welch y de Mann-Whitney y una advertencia de valor atípico
La comparación en SlideScope 1.22: un punto por muestra, la media y la DE de cada tratamiento, ambas pruebas y una advertencia sobre una imagen muy alejada del resto de su muestra. Datos de ejemplo, como arriba.

Controles antes de confiar en una diferencia

  • Imágenes atípicas: una imagen muy alejada de las demás imágenes de su muestra (z robusto mayor que 3.5) se marca y pasa a la cola de revisión.
  • Réplicas discordantes: se marca un tratamiento cuyas muestras varían mucho (coeficiente de variación mayor que 0.5).
  • Muy pocas muestras: se marca un tratamiento con menos de tres muestras, porque ninguna prueba puede decir mucho sobre él.
  • Calidad de imagen: los resultados con muy pocos objetos, píxeles saturados o una lámina deficiente se marcan con los mismos controles que Quantify usa en una sola imagen.
  • Correcciones registradas: los objetos que reclasificas o cuyo grado cambias, y las imágenes que excluyes con un motivo, quedan escritos en el texto de Métodos exportado.

Lo que no hace

  • No ejecuta pruebas post hoc por pares después del ANOVA, modelos mixtos ni cálculos de potencia. Para eso, exporta la tabla de muestras a Prism, R o Python.
  • Compara los valores que produjo una receta; no elige la receta ni la medición por ti.
  • Ask Your Slide responde preguntas sobre la imagen abierta. Todavía no responde preguntas sobre un experimento completo.
  • Es para investigación. No es un sistema de diagnóstico, y una diferencia estadísticamente significativa no es un hallazgo clínico.

Preguntas sobre el análisis de experimentos

¿Cómo comparo grupos de tratamiento en imágenes de microscopía?

Abre la carpeta en SlideScope y organiza sus imágenes como un experimento: tratamientos, muestras y réplicas, a partir de una hoja de muestras o de sugerencias basadas en los nombres de archivo. Con SlideScope Plus, aplica una receta de Quantify a todas las imágenes y luego elige Compare: SlideScope promedia las imágenes de cada muestra, dibuja un punto por muestra con la media y la DE de cada tratamiento, y ejecuta la prueba t de Welch y Mann-Whitney para dos tratamientos, o ANOVA y Kruskal-Wallis para más.

¿Por qué n es el número de muestras y no el de imágenes o células?

Las imágenes y las células de un mismo animal, paciente o cultivo no son independientes, así que contarlas como observaciones separadas infla n y hace que las diferencias parezcan más seguras de lo que son. SlideScope primero promedia las imágenes de cada muestra y ejecuta las pruebas sobre un valor por muestra.

¿Qué mediciones puedo comparar?

Cualquier valor que la receta de Quantify haya producido para cada imagen: número de objetos, densidad por mm², porcentaje de positivos, H-score, puntuación de Allred, área media de los objetos e intensidad media por canal.

¿El análisis de experimentos está incluido en todos los planes?

Organizar imágenes como un experimento está incluido en todos los planes. Aplicar una receta a todo el experimento, comparar tratamientos y revisar los resultados de la ejecución requieren SlideScope Plus. Quantify en sí, en una imagen o en una carpeta, está incluido en todos los planes.

¿SlideScope reemplaza a un paquete estadístico?

No. Ejecuta las pruebas estándar para dos grupos y para varios grupos sobre un valor por muestra y las presenta junto con los datos que las respaldan. No ejecuta pruebas post hoc por pares después del ANOVA, modelos mixtos ni cálculos de potencia; para eso, exporta la tabla de muestras a Prism, R o Python.

Respuestas rápidas

Ideal para: grupos de investigación que comparan tratamientos, genotipos o puntos temporales en muchas imágenes de cortes teñidos, cultivos u organoides, y que quieren que cada imagen se cuente de la misma manera y que n se reporte correctamente.

Puntos fuertes: una receta en todas las imágenes, la muestra como unidad estadística, controles de valores atípicos y de réplicas con una cola de revisión, y exportaciones con un párrafo de Métodos.

Limitación importante: solo pruebas estándar para dos grupos y para varios grupos; sin estadística post hoc ni modelos mixtos.

Última revisión: 11 de noviembre de 2026.

Cuenta todo un experimento de la misma manera

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