実験 · SlideScope 1.22.0 以降

顕微鏡実験全体で処理群を比較する

画像のフォルダを処理群、サンプル、反復に整理します。すべての画像に同じ計数または IHC スコアリングのレシピを実行し、ドットプロット、平均 ± SD、適切な統計検定で処理群を比較します。n は画像や細胞ではなく、サンプルの数として数えます。外れ値や一致しない反復はレビュー待ちに送られ、すべての表、プロット、方法の段落を論文用に書き出せます。

処理群、サンプル、反復 すべての画像に同じレシピ n = サンプル数(画像数ではない)

処理群の比較を手作業で行うと何が問題になるか

画像ごとに異なる設定

画像を 1 枚ずつ数えると、しきい値や領域が画像ごとに少しずつ変わりがちで、処理群間の差が生物学ではなく設定から生じることがあります。

水増しされた n

すべての画像、あるいはすべての細胞を独立した観測として扱うと、n は動物や培養の数よりはるかに大きくなり、p 値が実験の裏付け以上に説得力があるように見えてしまいます。

誰も確認していない外れ値

ピントの合っていない視野が 1 つ、あるいは組織の折れ込みが 1 か所あるだけで、サンプル全体の値が動くことがあります。数値だけが並ぶ表計算シートでは、その原因となった画像に立ち戻る手がかりがありません。

SlideScope での実験のしくみ

  1. SlideScope でフォルダを開きます。フォルダは中のすべての画像からなるデータセットとして開き、SlideScope が読み込める形式(CZI、ND2、SVS、NDPI、OME-TIFF、LIF など)の画像を扱えます。
  2. 実験として整理します。サンプルシートを読み込むか、ファイル名からの提案を受け入れて、各画像に処理群、サンプル、反復を割り当てます。画像を除外するときは理由を付けます。除外した画像も記録に残り、あとから戻せます。実験は画像の隣に置かれる小さなファイルなので、フォルダと一緒に移動します。
  3. すべての画像に1 つのレシピを実行します(Plus)。同じ Quantify の設定で各画像の核、細胞、粒子を数え、DAB をスコアリングするので、すべての数値が同じ方法で算出されます。
  4. 処理群を比較します(Plus)。計測項目を選ぶと、SlideScope がサンプルごとに 1 つの点をプロットして各処理群の平均と SD を示し、対応する検定を実行します。
  5. レビューして書き出します。フラグが付いた画像をレビュー待ちから開き、オブジェクトのクラスや IHC グレードを修正して、画像・サンプル・群の各表、プロット、方法の段落を書き出します。
溶媒対照群と薬剤群に整理されたデータセット。各画像にサンプルと反復が割り当てられ、「レシピを実行」と「比較」のボタンが表示されています
実験として整理したフォルダー:2 処理群、6 サンプル、13 画像。例示データ:EPFL BrdU IHC のクロップ画像(CC BY 4.0)。処理群とサンプルの名前はデモ用の架空のものです。

統計と、n がサンプル数である理由

同じ動物、患者、培養に由来する画像や細胞は独立ではありません。SlideScope はまず各サンプルの画像を平均し、サンプルごとに 1 つの値で検定を行うので、n は実際の生物学的反復の数になります。

処理群の数SlideScope が実行する検定表示内容
2 群Welch の t 検定(等分散を仮定しない)と Mann-Whitney の U 検定(順位ベース)全サンプルのドットプロット、平均 ± SD、処理群ごとの n
3 群以上一元配置分散分析(ANOVA)と Kruskal-Wallis の H 検定(順位ベース)すべての処理群について同じプロットと表

レシピがすべての画像について算出した値なら、どれでも比較できます:オブジェクト数、mm² あたり密度、陽性率、H-score、Allred スコア、平均オブジェクト面積、チャンネルごとの平均輝度。

溶媒対照群と薬剤群(各 n = 3)のサンプルごとの陽性核率のドットプロット。Welch の t 検定と Mann-Whitney の結果、外れ値の警告付き
SlideScope 1.22 の「比較」:サンプルごとに 1 つの点、各処理群の平均と SD、両方の検定、そして同じサンプルのほかの画像から大きく外れた画像についての警告。例示データは上記と同じです。

差を信頼する前のチェック

  • 外れ値の画像:同じサンプルのほかの画像から大きく外れた画像(ロバスト z が 3.5 超)にはフラグが付き、レビュー待ちに送られます。
  • 一致しない反復:サンプル間のばらつきが大きい処理群(変動係数が 0.5 超)にはフラグが付きます。
  • サンプル不足:サンプルが 3 つ未満の処理群には、どの検定でもほとんど何も言えないため、フラグが付きます。
  • 画質:オブジェクトが少なすぎる、画素がクリップしている、スライドの状態が悪いといった結果には、Quantify が 1 枚の画像で使うのと同じチェックでフラグが付きます。
  • 修正の記録:再分類や再グレーディングしたオブジェクト、理由を付けて除外した画像は、書き出される方法のテキストに記載されます。

できないこと

  • ANOVA 後のペアワイズ事後検定、混合モデル、検出力計算は行いません。これらには、サンプルの表を Prism、R、Python に書き出してください。
  • 比較するのは 1 つのレシピが算出した値です。レシピや計測項目を代わりに選ぶことはしません。
  • Ask Your Slide は開いている画像についての質問に答えます。実験全体についての質問にはまだ対応していません。
  • 研究用です。診断システムではなく、統計的に有意な差は臨床所見ではありません。

実験の解析に関するよくある質問

顕微鏡画像で処理群を比較するにはどうすればよいですか?

SlideScope でフォルダを開き、その画像を実験として整理します。処理群、サンプル、反復は、サンプルシートから、またはファイル名にもとづく提案から設定できます。SlideScope Plus では、すべての画像に 1 つの Quantify レシピを実行してから「比較」を選びます。SlideScope は各サンプルの画像を平均し、サンプルごとに 1 つの点と各処理群の平均と SD をプロットして、2 処理群なら Welch の t 検定と Mann-Whitney、それ以上なら ANOVA と Kruskal-Wallis を実行します。

なぜ n は画像数や細胞数ではなく、サンプル数なのですか?

同じ動物、患者、培養に由来する画像や細胞は独立ではないため、それらを別々の観測として数えると n が水増しされ、差が実際より確かに見えてしまいます。SlideScope はまず各サンプルの画像を平均し、サンプルごとに 1 つの値で検定を行います。

どの計測値を比較できますか?

Quantify のレシピがすべての画像について算出した値なら、どれでも比較できます:オブジェクト数、mm² あたり密度、陽性率、H-score、Allred スコア、平均オブジェクト面積、チャンネルごとの平均輝度。

実験の解析はすべてのプランに含まれていますか?

画像を実験として整理する機能は、すべてのプランに含まれています。実験全体へのレシピの実行、処理群の比較、実行結果のレビューには SlideScope Plus が必要です。Quantify そのものは、1 枚の画像でもフォルダでも、すべてのプランで使えます。

SlideScope は統計ソフトの代わりになりますか?

いいえ。サンプルごとに 1 つの値で標準的な 2 群検定と多群検定を実行し、その元となるデータとともに報告します。ANOVA 後のペアワイズ事後検定、混合モデル、検出力計算は行いません。これらには、サンプルの表を Prism、R、Python に書き出してください。

簡単な回答

最適な利用者:染色切片、培養、オルガノイドの多数の画像にわたって処理群、遺伝子型、時点を比較し、すべての画像を同じ方法で数えて n を正しく報告したい研究グループ。

主な強み:すべての画像に同じレシピ、統計単位としてのサンプル、レビュー待ち付きの外れ値・反復チェック、方法の段落付きの書き出し。

重要な制限:標準的な 2 群検定と多群検定のみ。事後検定や混合モデルの統計には対応していません。

最終確認日:2026 年 11 月 11 日。

実験全体を同じ方法で数える

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