实验功能 · SlideScope 1.22.0 起提供

在整个显微镜实验中比较不同处理

将一个文件夹中的图像按处理组、样本和重复整理好。对每张图像运行同一个计数或 IHC 评分配方,然后用点图、均值 ± SD 和合适的统计检验比较各处理组,其中 n 按样本计,而不是按图像或细胞计。离群图像和不一致的重复会进入审阅队列,所有表格、图表和方法段落都可以导出用于论文。

处理组、样本和重复 每张图像使用同一个配方 n = 样本数,而非图像数

为什么手动比较处理组容易出错

每张图像的设置不同

逐张单独计数时,阈值或区域很容易在图像之间发生细微变化,于是处理组之间的差异可能来自设置,而不是生物学本身。

被夸大的 n

把每张图像甚至每个细胞都当作独立观测,会让 n 远大于动物或培养物的实际数量,p 值看起来也会比实验所能支持的更有说服力。

无人查看的离群值

一个失焦视野或一处组织褶皱就可能让整个样本的数值偏移。在一张满是数字的电子表格里,没有任何线索能把您引回导致问题的那张图像。

在 SlideScope 中如何进行实验分析

  1. 在 SlideScope 中打开文件夹。它会以数据集的形式打开,包含其中的每张图像,只要是 SlideScope 能读取的格式均可:CZI、ND2、SVS、NDPI、OME-TIFF、LIF 等。
  2. 将其整理为实验。为每张图像指定处理组、样本和重复,可以导入样本表,也可以接受根据文件名给出的建议。排除某张图像时需注明原因:它会保留在记录中,之后也可以恢复。实验是图像旁边的一个小文件,因此会随文件夹一起移动。
  3. 对每张图像运行同一个配方(Plus)。相同的 Quantify 设置会在每张图像上计数细胞核、细胞或颗粒并进行 DAB 评分,因此每个数字都是以相同方式得出的。
  4. 比较处理组(Plus)。选择一项测量值,SlideScope 会为每个样本绘制一个点,标出每个处理组的均值和 SD,并运行相应的检验。
  5. 审阅和导出。从审阅队列打开任意一张被标记的图像,修正对象的类别或 IHC 分级,然后导出图像、样本和组别表格、图表以及方法段落。
一个整理为溶剂对照组和药物处理组的数据集,每张图像都有样本和重复,并显示“运行配方”和“比较”按钮
一个整理为实验的文件夹:2 个处理组、6 个样本、13 张图像。示例数据:EPFL BrdU IHC 裁剪图像(CC BY 4.0),处理组和样本名称为演示而虚构。

统计方法,以及为什么 n 是样本数

来自同一动物、患者或培养物的图像和细胞并不相互独立。SlideScope 会先对每个样本的图像取平均,再以每个样本一个数值进行检验,因此 n 就是您实际拥有的生物学重复数量。

处理组数SlideScope 运行的检验同时显示
两个Welch t 检验(不假设方差相等)和 Mann-Whitney U 检验(基于秩次)每个样本的点图、均值 ± SD、每个处理组的 n
三个或更多单因素方差分析(ANOVA)和 Kruskal-Wallis H 检验(基于秩次)每个处理组都有同样的图和表

您可以比较配方为每张图像得出的任何数值:对象计数、每 mm² 密度、阳性百分比、H-score、Allred 评分、平均对象面积或各通道的平均强度。

溶剂对照组和药物组中每个样本阳性细胞核百分比的点图,每组 n = 3,附 Welch t 检验和 Mann-Whitney 检验结果以及离群值警告
SlideScope 1.22 中的“比较”:每个样本一个点、每个处理组的均值和 SD、两种检验,以及一条警告,提示某张图像与所属样本中的其他图像相差甚远。示例数据同上。

在相信差异之前要做的检查

  • 离群图像:与同一样本中其他图像相差甚远的图像(稳健 z 值大于 3.5)会被标记并进入审阅队列。
  • 不一致的重复:样本之间差异很大(变异系数大于 0.5)的处理组会被标记。
  • 样本过少:样本少于三个的处理组会被标记,因为任何检验都无法据此得出有意义的结论。
  • 图像质量:对象过少、像素被截断或切片质量较差的结果,会被 Quantify 在单张图像上使用的同一套检查标记出来。
  • 修正均有记录:您重新分类或重新分级的对象,以及注明原因后排除的图像,都会写入导出的方法文本。

它不能做什么

  • 它不会在 ANOVA 之后进行两两事后检验,也不做混合模型或功效分析。如需这些分析,请将样本表导出到 Prism、R 或 Python。
  • 它比较的是同一个配方得出的数值;它不会替您选择配方或测量指标。
  • Ask Your Slide 回答关于当前打开图像的问题,目前还不能回答关于整个实验的问题。
  • 它面向科研用途,不是诊断系统;统计学上的显著差异也不等于临床发现。

关于实验分析的常见问题

如何比较显微镜图像中的不同处理组?

在 SlideScope 中打开文件夹,并将其中的图像整理为实验:处理组、样本和重复,可通过样本表或根据文件名给出的建议完成。使用 SlideScope Plus,对每张图像运行同一个 Quantify 配方,然后选择“比较”:SlideScope 会对每个样本的图像取平均,为每个样本绘制一个点,标出每个处理组的均值和 SD;两个处理组时运行 Welch t 检验和 Mann-Whitney 检验,更多处理组时运行 ANOVA 和 Kruskal-Wallis 检验。

为什么 n 是样本数,而不是图像数或细胞数?

来自同一动物、患者或培养物的图像和细胞并不相互独立,把它们当作独立观测会夸大 n,使差异看起来比实际更确定。SlideScope 会先对每个样本的图像取平均,再以每个样本一个数值进行检验。

我可以比较哪些测量值?

Quantify 配方为每张图像得出的任何数值:对象计数、每 mm² 密度、阳性百分比、H-score、Allred 评分、平均对象面积和各通道平均强度。

所有方案都包含实验分析吗?

所有方案都可以将图像整理为实验。在整个实验上运行同一个配方、比较处理组以及审阅运行结果需要 SlideScope Plus。Quantify 本身(无论用于单张图像还是文件夹)在所有方案中均可使用。

SlideScope 能取代统计软件吗?

不能。它以每个样本一个数值运行标准的两组和多组检验,并连同背后的数据一起报告结果。它不进行 ANOVA 之后的两两事后检验、混合模型或功效分析;如需这些分析,请将样本表导出到 Prism、R 或 Python。

快速解答

最适合:需要在大量染色切片、培养物或类器官图像中比较不同处理、基因型或时间点,并希望每张图像都以相同方式计数、n 报告正确的研究团队。

主要优势:每张图像使用同一个配方,以样本作为统计单位,带审阅队列的离群值和重复检查,以及附方法段落的导出。

重要限制:仅提供标准的两组和多组检验;不提供事后检验或混合模型统计。

最后审阅:2026 年 11 月 11 日。

以同样的方式计数整个实验

下载 SlideScope,在免费示例库上试用 Quantify,并使用 SlideScope Plus 运行您的实验。

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