Adicione uma barra de escala a uma imagem de microscópio
Abra um PNG ou JPEG, informe o tamanho de pixel ou meça uma distância conhecida na imagem e baixe-a com uma barra de escala limpa e do tamanho correto. A ferramenta roda inteiramente nesta página: sua imagem nunca é enviada. Abaixo dela: a calculadora do comprimento da barra de escala e o cálculo de aula de biologia do "tamanho real a partir de uma barra de escala".
Como adicionar uma barra de escala correta
- Obtenha o tamanho de pixel. O ideal: dos metadados do arquivo original (Fiji: Image › Properties; a maioria dos formatos de microscópio o registra). Caso contrário, calcule-o a partir da câmera e da objetiva com a calculadora de tamanho de pixel ou meça um micrômetro de platina.
- Use a imagem em resolução total. Se você redimensionou a imagem, ou a recortou e redimensionou, o tamanho de pixel mudou pelo mesmo fator. Uma redução de 2× dobra os µm por pixel.
- Escolha um comprimento redondo (1, 2, 5, 10, 20, 50, 100 µm…) de cerca de 10–20% da largura da imagem, para que seja lido num relance sem cobrir a amostra.
- Coloque-a em um canto livre, em uma cor que contraste com o fundo, e informe o comprimento na barra ou na legenda.
A ferramenta acima segue essas regras: deixe o comprimento em branco e ela escolhe um valor redondo próximo de um quinto da largura. A maioria dos navegadores não abre arquivos TIFF; salve um PNG antes (Fiji: File › Save As › PNG).
Fórmulas da barra de escala
comprimento da barra (px) = comprimento da barra (µm) ÷ tamanho de pixel (µm/px) · tamanho real = comprimento do objeto ÷ comprimento da barra × valor da barra
Exemplo resolvido (figura): 0,25 µm por pixel, uma barra de 50 µm: 50 ÷ 0,25 = 200 pixels.
Exemplo resolvido (questão de biologia): em uma micrografia impressa, a célula mede 36 mm com uma régua e a barra de escala de 10 µm mede 20 mm. Tamanho real = 36 ÷ 20 × 10 = 18 µm. Como os dois comprimentos são medidos com a mesma régua, a unidade deles se cancela; só o valor da barra define a unidade da resposta. A ampliação dessa impressão é 20 mm ÷ 10 µm = 20.000 µm ÷ 10 µm = ×2000.
Barras de escala no Fiji e no SlideScope
Fiji / ImageJ: defina ou confira a escala (Analyze › Set Scale), depois use Analyze › Tools › Scale Bar…, escolha largura, posição e cor e marque Overlay para manter os pixels intactos.
SlideScope: o visualizador lê o tamanho de pixel de CZI, ND2, SVS, LIF, OME-TIFF e dos outros formatos compatíveis e mostra uma barra de escala que acompanha o zoom. File › Make Figure… monta painéis com letras e barras de escala e escreve um parágrafo de Métodos a partir dos metadados do arquivo; salvar a figura exige uma assinatura. Quando um arquivo não tem tamanho de pixel, View › Set Pixel Size… adiciona um.
Perguntas
Como adicionar uma barra de escala a uma imagem de microscópio?
Você precisa do tamanho de pixel da imagem (µm por pixel). Divida o comprimento de barra desejado por ele para obter o comprimento da barra em pixels e então desenhe-a, ou use a ferramenta desta página, o Analyze › Tools › Scale Bar do Fiji ou o software do seu microscópio.
Como calcular o tamanho real de uma amostra a partir de uma barra de escala?
Meça o objeto e a barra de escala com uma régua, divida o comprimento do objeto pelo comprimento da barra e multiplique pelo valor da barra: 36 mm ÷ 20 mm × 10 µm = 18 µm.
Minha imagem é enviada?
Não. A imagem é lida pelo seu navegador e desenhada em um canvas nesta página; nada é enviado a um servidor. Fechar a aba a descarta.
Qual deve ser o comprimento de uma barra de escala?
Um número redondo (1, 2, 5 × uma potência de dez) que ocupe aproximadamente 10–20% da largura da imagem. Barras muito curtas são difíceis de ler; barras muito longas cobrem a amostra.
Posso adicionar uma barra de escala a um TIFF?
A maioria dos navegadores não exibe arquivos TIFF, então salve a imagem como PNG primeiro. Ferramentas para desktop como o Fiji ou o SlideScope abrem o TIFF diretamente e leem a calibração dele.
Esta ferramenta é gratuita?
Sim. Ela roda no seu navegador e não envia nada a lugar nenhum. O SlideScope, o aplicativo de microscopia para desktop feito pela mesma equipe, é um aplicativo pago com uma biblioteca de amostras gratuita (todas as ferramentas) e uma assinatura para suas próprias imagens.
Fontes
Os resultados são teóricos ou aritméticos; confira-os com a documentação do seu instrumento antes de usá-los em trabalhos clínicos ou regulamentados.
Meça nas suas imagens reais
O SlideScope abre 34 formatos de microscópios e scanners de lâminas, entre eles CZI, ND2, SVS e LIF, com a calibração de cada arquivo, então comprimentos, áreas, contagens de células e barras de escala saem em µm sem nenhuma configuração. Experimente todas as ferramentas de graça com as amostras incluídas; para abrir suas próprias imagens, é preciso uma assinatura. Já decidiu? Assine agora.