Figuras
Adicionar uma barra de escala a uma imagem de microscópio
Abra um PNG ou JPEG, introduza o tamanho do píxel ou meça uma distância conhecida na imagem e transfira-a com uma barra de escala limpa e com o tamanho correto. A ferramenta funciona inteiramente nesta página: a sua imagem nunca é carregada. Mais abaixo: a calculadora do comprimento da barra de escala e o cálculo das aulas de biologia "tamanho real a partir de uma barra de escala".
Como adicionar uma barra de escala correta
- Obtenha o tamanho do píxel. O ideal: a partir dos metadados do ficheiro original (Fiji: Image › Properties; a maioria dos formatos de microscópio regista-o). Caso contrário, calcule-o a partir da câmara e da objetiva com a calculadora de tamanho de píxel, ou meça um micrómetro de platina.
- Use a imagem em resolução completa. Se redimensionou ou recortou e reescalou a imagem, o tamanho do píxel mudou na mesma proporção. Uma redução de 2× duplica os µm por píxel.
- Escolha um comprimento redondo (1, 2, 5, 10, 20, 50, 100 µm…) de cerca de 10–20 % da largura da imagem, para que se leia de relance sem tapar a amostra.
- Coloque-a num canto livre, numa cor que contraste com o fundo, e indique o comprimento na barra ou na legenda.
A ferramenta acima segue estas regras: deixe o comprimento em branco e ela escolhe um valor redondo próximo de um quinto da largura. A maioria dos navegadores não abre ficheiros TIFF; guarde primeiro um PNG (Fiji: File › Save As › PNG).
Fórmulas da barra de escala
comprimento da barra (px) = comprimento da barra (µm) ÷ tamanho do píxel (µm/px) · tamanho real = comprimento do objeto ÷ comprimento da barra × valor da barra
Exemplo resolvido (figura): 0,25 µm por píxel, uma barra de 50 µm: 50 ÷ 0,25 = 200 píxeis.
Exemplo resolvido (pergunta de biologia): numa micrografia impressa, a célula mede 36 mm com uma régua e a barra de escala de 10 µm mede 20 mm. Tamanho real = 36 ÷ 20 × 10 = 18 µm. Como os dois comprimentos são medidos com a mesma régua, a unidade cancela-se; só o valor da barra define a unidade da resposta. A ampliação dessa impressão é 20 mm ÷ 10 µm = 20 000 µm ÷ 10 µm = ×2000.
Barras de escala no Fiji e no SlideScope
Fiji / ImageJ: defina ou verifique a escala (Analyze › Set Scale) e, depois, Analyze › Tools › Scale Bar…, escolha a largura, a posição e a cor e assinale Overlay para manter os píxeis intactos.
SlideScope: o visualizador lê o tamanho do píxel de CZI, ND2, SVS, LIF, OME-TIFF e dos outros formatos suportados e mostra uma barra de escala que acompanha o zoom. File › Make Figure… dispõe painéis com letras e barras de escala e escreve um parágrafo de Métodos a partir dos metadados do ficheiro; guardar a figura requer uma subscrição. Quando um ficheiro não tem tamanho do píxel, View › Set Pixel Size… acrescenta-o.
Perguntas
Como adiciono uma barra de escala a uma imagem de microscópio?
Precisa do tamanho do píxel da imagem (µm por píxel). Divida por ele o comprimento de barra que pretende para obter o comprimento da barra em píxeis e, depois, desenhe-a, ou use a ferramenta desta página, o Analyze › Tools › Scale Bar do Fiji ou o software do seu microscópio.
Como calculo o tamanho real de uma amostra a partir de uma barra de escala?
Meça o objeto e a barra de escala com uma régua, divida o comprimento do objeto pelo comprimento da barra e multiplique pelo valor da barra: 36 mm ÷ 20 mm × 10 µm = 18 µm.
A minha imagem é carregada?
Não. A imagem é lida pelo seu navegador e desenhada num canvas nesta página; nada é enviado para um servidor. Fechar o separador elimina-a.
Que comprimento deve ter uma barra de escala?
Um número redondo (1, 2, 5 × uma potência de dez) que ocupe aproximadamente 10–20 % da largura da imagem. As barras muito curtas são difíceis de ler; as muito compridas tapam a amostra.
Posso adicionar uma barra de escala a um TIFF?
A maioria dos navegadores não consegue mostrar ficheiros TIFF, por isso guarde primeiro a imagem como PNG. As ferramentas para computador, como o Fiji ou o SlideScope, abrem o TIFF diretamente e leem a respetiva calibração.
Esta ferramenta é gratuita?
Sim. Funciona no seu navegador e não envia nada para lado nenhum. O SlideScope, a aplicação de microscopia para computador da mesma equipa, é uma aplicação paga com uma biblioteca de amostras gratuita (todas as ferramentas) e uma subscrição para as suas próprias imagens.
Fontes
Os resultados são teóricos ou aritméticos; confronte-os com a documentação do seu instrumento antes de confiar neles para trabalho clínico ou regulamentado.
Meça nas suas imagens reais
O SlideScope abre 34 formatos de microscópios e digitalizadores de lâminas, entre eles CZI, ND2, SVS e LIF, com a respetiva calibração, pelo que comprimentos, áreas, contagens de células e barras de escala saem em µm sem configurar nada. Experimente gratuitamente todas as ferramentas nas amostras incluídas; para abrir as suas próprias imagens precisa de uma subscrição. Já decidiu? Subscreva agora.