Ki-67-Index-Rechner

Ki-67-Index-Rechner

So wird der Ki-67-Index berechnet

Ki-67 ist ein Kernprotein, das in Zellen im Zellzyklus vorhanden ist und in ruhenden Zellen fehlt; der Anteil der Tumorzellkerne, die dafür angefärbt sind, ist daher ein Maß für die Proliferation. Der Ki-67-Index (auch Markierungsindex oder Proliferationsindex) ist dieser Anteil in Prozent.

Ki-67-Index (%) = positive Tumorzellkerne ÷ (positive + negative Tumorzellkerne) × 100

Rechenbeispiel: 180 braune (positive) und 820 blaue (negative) Tumorzellkerne sind insgesamt 1.000 Kerne, der Index beträgt also 180 ÷ 1.000 × 100 = 18 %. Eine Zählung von 1.000 Kernen grenzt das nur auf etwa 15,7 % bis 20,5 % ein; dieselben 18 % aus 200 Kernen könnten irgendwo zwischen etwa 13 % und 24 % liegen.

Jede Kernfärbung über dem Hintergrund gilt in der Regel als positiv, unabhängig von ihrer Stärke; gezählt werden nur Tumorzellkerne, keine Lymphozyten, kein Stroma und kein Endothel.

Wo zählen: ganzer Schnitt oder Hotspot

Die Ki-67-Färbung ist selten gleichmäßig, daher verändert die Wahl des Zählorts das Ergebnis stärker als die Rechnung. Verwenden Sie die Methode, die die Leitlinie für Ihre Tumorart vorgibt, und geben Sie an, welche Sie verwendet haben.

• Global (Mammakarzinom): Die International Ki67 in Breast Cancer Working Group empfiehlt eine standardisierte visuelle Methode, die Felder bewertet, die das Spektrum der Färbung im Schnitt abbilden, und einen gewichteten globalen Score festhält, statt sich allein auf den Hotspot zu stützen, der zwischen Beobachtern stärker schwankte.
• Hotspot (neuroendokrine Tumoren): Beim Grading wird der Index im Areal mit der höchsten Markierung bestimmt, mit mindestens 500 dort gezählten Tumorzellen, und viele Labore zählen auf einem ausgedruckten oder aufgenommenen Bild statt nach Augenmaß.
• Schätzen nach Augenmaß ist die schwächste Methode: Schätzungen ohne Zählung schwanken am stärksten zwischen Beobachtern. Das Zählen auf einem aufgenommenen Bild oder mit einer Bildanalyse, die Sie überprüft haben, ist besser reproduzierbar.

Für dieselbe Arbeitsgruppe waren Werte von 5 % oder weniger und von 30 % oder mehr die Bereiche, in denen Ki-67 als verlässlich genug galt, um beim frühen Mammakarzinom in die Prognose einzufließen; Werte dazwischen stimmten zwischen Laboren weniger gut überein. Klinische Schwellenwerte gehören in die Leitlinie für die jeweilige Tumorart, nicht auf diese Seite.

Wie viele Kerne zählen?

Eine Zählung ist eine Stichprobe, und ihre Unsicherheit schrumpft mit der Quadratwurzel der gezählten Anzahl. Das Intervall, das der Rechner anzeigt, ist das Wilson-Intervall für einen Anteil. Für die Planung genügt die übliche Normalapproximation: Bei einem erwarteten Index p und einer gewünschten Fehlergrenze von ± m (beide als Anteile) braucht man für ein 95-%-Intervall etwa so viele Kerne:

n = 1,96² × p × (1 − p) ÷ m²

Das ist nur der Zählfehler. Er sagt nichts darüber aus, welche Felder Sie gewählt oder wo Sie die Grenze zwischen positiv und negativ gezogen haben; deshalb ist eine feste Methode wichtiger als eine sehr große Zählung.

Denselben Score mit Software erhalten

Bildanalyse-Software kommt mit derselben Rechnung zu diesen Scores, nur ersetzt eine Messung das Auge. Sie findet jeden Zellkern in der Region, trennt die braune DAB-Färbung per Farbdekonvolution vom blauen Hämatoxylin, misst die mittlere optische DAB-Dichte jedes Kerns und stuft ihn anhand von Schwellenwerten ein, die Sie festlegen: eine Schwelle für positiv oder negativ, drei für 1+, 2+ und 3+.

• QuPath (kostenlos, Open Source): Positive cell detection mit einer Schwelle liefert den Positivanteil; mit drei Schwellen gibt es auch den H-Score aus.
• Fiji / ImageJ (kostenlos): Colour Deconvolution mit den Vektoren H DAB, dann Schwellenwert und Zählung; die Score-Rechnung übernehmen Sie selbst.
• SlideScope: zählt die Zellkerne in der von Ihnen gewählten Region, stuft jeden ein und gibt Positivanteil, H-Score und Allred-Score zusammen aus, nach denselben Definitionen wie QuPath. Sie können auch in natürlicher Sprache fragen, mit Ask Your Slide; jede Zahl stammt aus dem lokalen Werkzeug, mit Umrissen zur Überprüfung. Nur für Forschungszwecke.

Welches Werkzeug Sie auch verwenden, die Schwellenwerte sind Entscheidungen: Halten Sie sie im Methodenteil fest, prüfen Sie die Umrisse am Bild und behalten Sie sie für alle Präparate bei, die Sie vergleichen. Schritt für Schritt: IHC-Färbung quantifizieren.

Fragen

Quellen

• Nielsen TO et al. Assessment of Ki67 in breast cancer: updated recommendations from the International Ki67 in Breast Cancer Working Group. J Natl Cancer Inst 2021;113(7):808-819
• Trikalinos NA et al. Accuracy of grading in pancreatic neuroendocrine neoplasms and effect on survival estimates. Ann Surg Oncol 2020 (Hotspot-Zählung von mindestens 500 Zellen)
• QuPath-Dokumentation: Ki67-Markierungsindex mit Positive cell detection
• NIST/SEMATECH e-Handbook of Statistical Methods, 7.2.4.1: Konfidenzintervalle für einen Anteil (die Wilson-Methode)

Diese Rechner übernehmen Rechenarbeit für Forschung und Lehre. Sie sind kein diagnostisches Werkzeug: Das Scoring für die Patientenversorgung folgt dem validierten Assay, der aktuellen Leitlinie für den jeweiligen Marker und dem Urteil einer Pathologin oder eines Pathologen.