H-Score-Rechner

H-Score-Rechner

So wird der H-Score berechnet

Der H-Score (Histoscore) fasst zwei Dinge in einer Zahl zusammen: wie viele Zellen gefärbt sind und wie stark. Jede Zelle der bewerteten Population, meist der Tumorzellen, erhält den Grad 0 (negativ), 1+ (schwach), 2+ (mäßig) oder 3+ (stark). Der Prozentanteil der Zellen jedes Grades wird mit diesem Grad multipliziert, und die drei Produkte werden addiert.

H-Score = 1 × (% Zellen 1+) + 2 × (% Zellen 2+) + 3 × (% Zellen 3+)

Rechenbeispiel: 30 % der Zellen färben sich schwach, 20 % mäßig und 10 % stark; die übrigen 40 % sind negativ. H-Score = 30 × 1 + 20 × 2 + 10 × 3 = 100, bei 60 % positiven Zellen. Aus Zählungen ergibt sich dieselbe Summe: Von 400 Zellen ergeben 120 schwach, 80 mäßig und 40 stark gefärbte (120 + 160 + 120) ÷ 400 × 100 = 100.

Der Score wurde in den 1980er-Jahren für die Färbung des Östrogenrezeptors eingeführt, als Auswertung, die „sowohl die Intensität als auch die Verteilung der Färbung einbezog“, und wird heute für viele nukleäre, zytoplasmatische und membranständige Marker verwendet.

Was die Zahl aussagt und was nicht

• Verschiedene Präparate, gleicher Score: 100 % schwach gefärbte Zellen und 33 % stark gefärbte Zellen ergeben beide etwa 100. Geben Sie neben dem H-Score den Positivanteil oder den Prozentanteil je Intensität an.
• Kein universeller Cut-off: Welcher Score als „hoch“ oder „positiv“ gilt, hängt vom Marker, vom Antikörper, vom Assay und von der Studie ab. Übernehmen Sie den Schwellenwert aus der Publikation oder Leitlinie, der Sie folgen, und geben Sie ihn an.
• Die Intensität nach Augenmaß ist subjektiv: Wo schwach endet und mäßig beginnt, beurteilen verschiedene Beobachter unterschiedlich. Bewerten Sie im Vergleich mit Kontrollen aus demselben Färbelauf und lassen Sie eine Stichprobe der Präparate von einer zweiten Person bewerten.
• Die richtigen Zellen bewerten: Zählen Sie nur die Zellpopulation, in der der Marker beurteilt wird, und lassen Sie Stroma, Lymphozyten, Nekrosen und Randartefakte weg, sofern Ihr Protokoll nichts anderes vorsieht.
• Genügend Zellen zählen: Ein Score aus wenigen Dutzend Zellen verschiebt sich mit jeder einzelnen Zelle deutlich. Mehrere hundert Zellen aus repräsentativen Feldern sind ein übliches Minimum.

Denselben Score mit Software erhalten

Bildanalyse-Software kommt mit derselben Rechnung zu diesen Scores, nur ersetzt eine Messung das Auge. Sie findet jeden Zellkern in der Region, trennt die braune DAB-Färbung per Farbdekonvolution vom blauen Hämatoxylin, misst die mittlere optische DAB-Dichte jedes Kerns und stuft ihn anhand von Schwellenwerten ein, die Sie festlegen: eine Schwelle für positiv oder negativ, drei für 1+, 2+ und 3+.

• QuPath (kostenlos, Open Source): Positive cell detection mit einer Schwelle liefert den Positivanteil; mit drei Schwellen gibt es auch den H-Score aus.
• Fiji / ImageJ (kostenlos): Colour Deconvolution mit den Vektoren H DAB, dann Schwellenwert und Zählung; die Score-Rechnung übernehmen Sie selbst.
• SlideScope: zählt die Zellkerne in der von Ihnen gewählten Region, stuft jeden ein und gibt Positivanteil, H-Score und Allred-Score zusammen aus, nach denselben Definitionen wie QuPath. Sie können auch in natürlicher Sprache fragen, mit Ask Your Slide; jede Zahl stammt aus dem lokalen Werkzeug, mit Umrissen zur Überprüfung. Nur für Forschungszwecke.

Welches Werkzeug Sie auch verwenden, die Schwellenwerte sind Entscheidungen: Halten Sie sie im Methodenteil fest, prüfen Sie die Umrisse am Bild und behalten Sie sie für alle Präparate bei, die Sie vergleichen. Schritt für Schritt: IHC-Färbung quantifizieren.

Fragen

Quellen

• McCarty KS Jr et al. Use of a monoclonal anti-estrogen receptor antibody in the immunohistochemical evaluation of human tumors. Cancer Res 1986;46(8 Suppl):4244s-4248s (der HSCORE)
• Wen Z et al. Deep learning-based H-score quantification of immunohistochemistry-stained images. Mod Pathol 2023 (Formel und Bereich von 0 bis 300)
• QuPath-Dokumentation: Zellklassifizierung, Intensitätsschwellen und H-Score

Diese Rechner übernehmen Rechenarbeit für Forschung und Lehre. Sie sind kein diagnostisches Werkzeug: Das Scoring für die Patientenversorgung folgt dem validierten Assay, der aktuellen Leitlinie für den jeweiligen Marker und dem Urteil einer Pathologin oder eines Pathologen.