Calculadora de H-score

Calculadora de H-score

Cómo se calcula el H-score

El H-score (histoscore) reúne dos cosas en un solo número: cuántas células están teñidas y con qué intensidad. Cada célula de la población que puntúas, por lo general las células tumorales, se clasifica como 0 (negativa), 1+ (débil), 2+ (moderada) o 3+ (intensa). El porcentaje de células de cada grado se multiplica por ese grado y se suman los tres productos.

H-score = 1 × (% de células 1+) + 2 × (% de células 2+) + 3 × (% de células 3+)

Ejemplo resuelto: 30 % de las células se tiñe débilmente, 20 % de forma moderada y 10 % intensamente; el 40 % restante es negativo. H-score = 30 × 1 + 20 × 2 + 10 × 3 = 100, con 60 % de células positivas. A partir de conteos, la suma es la misma: de 400 células, 120 débiles, 80 moderadas y 40 intensas dan (120 + 160 + 120) ÷ 400 × 100 = 100.

La puntuación se introdujo para la tinción del receptor de estrógeno en la década de 1980, como una evaluación que “incorporaba tanto la intensidad como la distribución de la tinción”, y hoy se usa para muchos marcadores nucleares, citoplasmáticos y de membrana.

Lo que el número puede y no puede decirte

• Láminas distintas, misma puntuación: 100 % de células débiles y 33 % de células intensas dan, ambos, alrededor de 100. Reporta el porcentaje de positivos, o el porcentaje en cada intensidad, junto al H-score.
• No hay un punto de corte universal: la puntuación que se considera “alta” o “positiva” depende del marcador, el anticuerpo, el ensayo y el estudio. Toma el umbral del artículo o la guía que sigues, e indícalo.
• La intensidad a simple vista es subjetiva: dónde termina la tinción débil y empieza la moderada varía entre observadores. Puntúa frente a controles teñidos en la misma corrida y pide a un segundo lector que puntúe una muestra de las láminas.
• Puntúa las células correctas: cuenta solo la población celular en la que se lee el marcador y excluye estroma, linfocitos, necrosis y artefactos de borde, a menos que tu protocolo indique otra cosa.
• Cuenta suficientes células: una puntuación obtenida con unas pocas decenas de células cambia mucho con cada célula. Varios cientos de células en campos representativos es un mínimo habitual.

Obtener la misma puntuación con software

El software de análisis de imágenes llega a estas puntuaciones con la misma aritmética, pero reemplaza el ojo por una medición. Detecta todos los núcleos de la región, separa la tinción marrón de DAB de la hematoxilina azul mediante deconvolución de color, mide la densidad óptica media de DAB de cada núcleo y lo clasifica según los umbrales que definas: un umbral para positivo o negativo, y tres para 1+, 2+ y 3+.

• QuPath (gratuito, de código abierto): Positive cell detection con un umbral da el porcentaje de positivos; con tres umbrales, también reporta el H-score.
• Fiji / ImageJ (gratuito): Colour Deconvolution con los vectores H DAB y luego umbral y conteo; la aritmética de la puntuación la haces tú.
• SlideScope: cuenta los núcleos de la región que elijas, clasifica cada uno por grado y reporta a la vez el porcentaje de positivos, el H-score y la puntuación de Allred, con las mismas definiciones que QuPath. También puedes preguntar en lenguaje natural con Ask Your Slide; cada número sale de la herramienta local, con contornos para verificarlo. Solo para uso en investigación.

Uses la herramienta que uses, los umbrales son decisiones tuyas: anótalos en tus métodos, verifica los contornos contra la imagen y mantenlos fijos en todas las láminas que compares. Paso a paso: cómo cuantificar la tinción de IHQ.

Preguntas

Fuentes

• McCarty KS Jr et al. Use of a monoclonal anti-estrogen receptor antibody in the immunohistochemical evaluation of human tumors. Cancer Res 1986;46(8 Suppl):4244s-4248s (el HSCORE)
• Wen Z et al. Deep learning-based H-score quantification of immunohistochemistry-stained images. Mod Pathol 2023 (fórmula y rango de 0 a 300)
• Documentación de QuPath: clasificación celular, umbrales de intensidad y H-score

Estas calculadoras hacen cálculos para investigación y docencia. No son una herramienta de diagnóstico: la puntuación para la atención de pacientes sigue el ensayo validado, la guía vigente para ese marcador y el criterio de un patólogo.