Calculadora de H-score

Calculadora de H-score

Cómo se calcula el H-score

El H-score (histoscore) reúne dos cosas en un solo número: cuántas células están teñidas y con qué intensidad. Cada célula de la población que puntúas, normalmente las células tumorales, se gradúa como 0 (negativa), 1+ (débil), 2+ (moderada) o 3+ (intensa). El porcentaje de células de cada grado se multiplica por ese grado y se suman los tres productos.

H-score = 1 × (% de células 1+) + 2 × (% de células 2+) + 3 × (% de células 3+)

Ejemplo resuelto: el 30 % de las células se tiñe débilmente, el 20 % de forma moderada y el 10 % intensamente; el 40 % restante es negativo. H-score = 30 × 1 + 20 × 2 + 10 × 3 = 100, con un 60 % de células positivas. A partir de recuentos, la suma es la misma: de 400 células, 120 débiles, 80 moderadas y 40 intensas dan (120 + 160 + 120) ÷ 400 × 100 = 100.

La puntuación se introdujo para la tinción del receptor de estrógenos en la década de 1980, como una evaluación que “incorporaba tanto la intensidad como la distribución de la tinción”, y hoy se usa para muchos marcadores nucleares, citoplasmáticos y de membrana.

Lo que el número puede y no puede decirte

• Portaobjetos distintos, misma puntuación: un 100 % de células débiles y un 33 % de células intensas dan ambos alrededor de 100. Indica el porcentaje de positivos, o el porcentaje en cada intensidad, junto al H-score.
• No hay un valor de corte universal: la puntuación que se considera “alta” o “positiva” depende del marcador, el anticuerpo, el ensayo y el estudio. Toma el umbral del artículo o la guía que sigas, e indícalo.
• La intensidad a ojo es subjetiva: dónde termina la tinción débil y empieza la moderada varía entre observadores. Puntúa frente a controles teñidos en la misma tanda y pide a un segundo lector que puntúe una muestra de los portaobjetos.
• Puntúa las células correctas: cuenta solo la población celular en la que se lee el marcador y excluye estroma, linfocitos, necrosis y artefactos de borde, salvo que tu protocolo indique otra cosa.
• Cuenta suficientes células: una puntuación obtenida con unas pocas decenas de células cambia mucho con cada célula. Varios cientos de células en campos representativos es un mínimo habitual.

Obtener la misma puntuación con software

El software de análisis de imagen llega a estas puntuaciones con la misma aritmética, pero sustituye el ojo por una medición. Detecta todos los núcleos de la región, separa la tinción marrón de DAB de la hematoxilina azul mediante deconvolución de color, mide la densidad óptica media de DAB de cada núcleo y lo gradúa según los umbrales que fijes: un umbral para positivo o negativo, y tres para 1+, 2+ y 3+.

• QuPath (gratuito, de código abierto): Positive cell detection con un umbral da el porcentaje de positivos; con tres umbrales, también indica el H-score.
• Fiji / ImageJ (gratuito): Colour Deconvolution con los vectores H DAB y, después, umbral y recuento; la aritmética de la puntuación corre de tu cuenta.
• SlideScope: cuenta los núcleos de la región que elijas, gradúa cada uno e indica a la vez el porcentaje de positivos, el H-score y la puntuación de Allred, con las mismas definiciones que QuPath. También puedes preguntar en lenguaje natural con Ask Your Slide; cada número procede de la herramienta local, con contornos para comprobarlo. Solo para uso en investigación.

Uses lo que uses, los umbrales son decisiones tuyas: anótalos en los métodos, comprueba los contornos con la imagen y mantenlos fijos en todos los portaobjetos que compares. Paso a paso: cómo cuantificar la tinción de IHQ.

Preguntas

Fuentes

• McCarty KS Jr et al. Use of a monoclonal anti-estrogen receptor antibody in the immunohistochemical evaluation of human tumors. Cancer Res 1986;46(8 Suppl):4244s-4248s (el HSCORE)
• Wen Z et al. Deep learning-based H-score quantification of immunohistochemistry-stained images. Mod Pathol 2023 (fórmula y rango de 0 a 300)
• Documentación de QuPath: clasificación celular, umbrales de intensidad y H-score

Estas calculadoras hacen cálculos para investigación y docencia. No son una herramienta diagnóstica: la puntuación para la atención al paciente sigue el ensayo validado, la guía vigente para ese marcador y el criterio de un patólogo.