Công cụ tính H-score

Công cụ tính H-score

Cách tính H-score

H-score (histoscore) gộp hai yếu tố vào một con số: có bao nhiêu tế bào bắt màu và bắt màu mạnh đến đâu. Mỗi tế bào trong quần thể bạn chấm điểm, thường là tế bào u, được xếp mức 0 (âm tính), 1+ (yếu), 2+ (vừa) hoặc 3+ (mạnh). Tỷ lệ phần trăm tế bào ở mỗi mức được nhân với mức đó, rồi cộng ba tích lại.

H-score = 1 × (% tế bào 1+) + 2 × (% tế bào 2+) + 3 × (% tế bào 3+)

Ví dụ minh họa: 30 % tế bào bắt màu yếu, 20 % vừa và 10 % mạnh; 40 % còn lại âm tính. H-score = 30 × 1 + 20 × 2 + 10 × 3 = 100, với 60 % tế bào dương tính. Tính từ số đếm cũng là phép cộng đó: trong 400 tế bào, 120 yếu, 80 vừa và 40 mạnh cho (120 + 160 + 120) ÷ 400 × 100 = 100.

Điểm số này được giới thiệu cho nhuộm thụ thể estrogen vào thập niên 1980, như một cách đánh giá “kết hợp cả cường độ lẫn sự phân bố của mức nhuộm”, và nay được dùng cho nhiều chất đánh dấu ở nhân, bào tương và màng tế bào.

Con số này cho biết gì và không cho biết gì

• Tiêu bản khác nhau, cùng một điểm: 100 % tế bào yếu và 33 % tế bào mạnh đều cho khoảng 100. Hãy báo cáo phần trăm dương tính, hoặc tỷ lệ phần trăm ở từng mức cường độ, bên cạnh H-score.
• Không có ngưỡng cắt chung: điểm bao nhiêu được xem là “cao” hay “dương tính” tùy thuộc vào chất đánh dấu, kháng thể, xét nghiệm và nghiên cứu. Hãy lấy ngưỡng từ bài báo hoặc hướng dẫn bạn đang theo, và ghi rõ ngưỡng đó.
• Đánh giá cường độ bằng mắt mang tính chủ quan: ranh giới giữa yếu và vừa khác nhau giữa các người đọc. Hãy chấm điểm đối chiếu với mẫu chứng nhuộm cùng mẻ, và nhờ người đọc thứ hai chấm một phần tiêu bản.
• Chấm điểm đúng tế bào: chỉ đếm quần thể tế bào mà chất đánh dấu được đọc trên đó, và loại trừ mô đệm, tế bào lympho, vùng hoại tử và ảnh giả ở rìa, trừ khi quy trình của bạn quy định khác.
• Đếm đủ tế bào: điểm tính từ vài chục tế bào thay đổi nhiều theo từng tế bào. Vài trăm tế bào trên các vi trường đại diện là mức tối thiểu thường dùng.

Có được cùng điểm số bằng phần mềm

Phần mềm phân tích ảnh tính ra các điểm số này bằng cùng phép tính, chỉ thay mắt người bằng phép đo. Phần mềm tìm mọi nhân trong vùng, tách màu nâu của DAB khỏi màu xanh của hematoxylin bằng phương pháp tách màu (colour deconvolution), đo mật độ quang DAB trung bình của từng nhân và phân mức theo các ngưỡng bạn đặt: một ngưỡng cho dương tính hay âm tính, ba ngưỡng cho 1+, 2+ và 3+.

• QuPath (miễn phí, mã nguồn mở): Positive cell detection với một ngưỡng cho phần trăm dương tính; với ba ngưỡng, phần mềm báo cáo thêm H-score.
• Fiji / ImageJ (miễn phí): Colour Deconvolution với vector H DAB, rồi phân ngưỡng và đếm; phần tính điểm bạn phải tự làm.
• SlideScope: đếm nhân trong vùng bạn chọn, phân mức từng nhân và báo cáo cùng lúc phần trăm dương tính, H-score và điểm Allred, theo cùng định nghĩa với QuPath. Bạn cũng có thể hỏi bằng ngôn ngữ thông thường với Ask Your Slide; mọi con số đều đến từ công cụ chạy trên máy, kèm đường viền để kiểm tra. Chỉ dùng cho nghiên cứu.

Dù dùng công cụ nào, các ngưỡng đều là lựa chọn của bạn: hãy ghi chúng vào phần phương pháp, đối chiếu đường viền với ảnh và giữ cố định trên mọi tiêu bản bạn so sánh. Hướng dẫn từng bước: cách định lượng nhuộm IHC.

Câu hỏi

Nguồn

• McCarty KS Jr et al. Use of a monoclonal anti-estrogen receptor antibody in the immunohistochemical evaluation of human tumors. Cancer Res 1986;46(8 Suppl):4244s-4248s (HSCORE)
• Wen Z et al. Deep learning-based H-score quantification of immunohistochemistry-stained images. Mod Pathol 2023 (công thức và thang 0 đến 300)
• Tài liệu QuPath: phân loại tế bào, ngưỡng cường độ và H-score

Các công cụ tính này chỉ làm phép tính phục vụ nghiên cứu và giảng dạy. Chúng không phải là công cụ chẩn đoán: việc chấm điểm phục vụ chăm sóc bệnh nhân phải tuân theo xét nghiệm đã được thẩm định, hướng dẫn hiện hành cho chất đánh dấu đó và nhận định của bác sĩ giải phẫu bệnh.