H-score कैलकुलेटर

H-score कैलकुलेटर

H-score की गणना कैसे होती है

H-score (हिस्टोस्कोर) दो बातों को एक संख्या में जोड़ता है: कितनी कोशिकाएँ स्टेन हुई हैं और कितनी तीव्रता से। आप जिस कोशिका समूह को स्कोर कर रहे हैं, आमतौर पर ट्यूमर कोशिकाएँ, उसकी हर कोशिका को 0 (नेगेटिव), 1+ (कमज़ोर), 2+ (मध्यम) या 3+ (तीव्र) ग्रेड दिया जाता है। हर ग्रेड पर कोशिकाओं के प्रतिशत को उसी ग्रेड से गुणा किया जाता है और तीनों गुणनफल जोड़ दिए जाते हैं।

H-score = 1 × (1+ कोशिकाओं का %) + 2 × (2+ कोशिकाओं का %) + 3 × (3+ कोशिकाओं का %)

हल किया हुआ उदाहरण: 30 % कोशिकाएँ कमज़ोर, 20 % मध्यम और 10 % तीव्र रूप से स्टेन होती हैं; बाकी 40 % नेगेटिव हैं। H-score = 30 × 1 + 20 × 2 + 10 × 3 = 100, और 60 % कोशिकाएँ पॉज़िटिव हैं। गिनती से भी यही योग बनता है: 400 कोशिकाओं में से 120 कमज़ोर, 80 मध्यम और 40 तीव्र से (120 + 160 + 120) ÷ 400 × 100 = 100 मिलता है।

यह स्कोर 1980 के दशक में एस्ट्रोजन रिसेप्टर स्टेनिंग के लिए एक ऐसे मूल्यांकन के रूप में शुरू हुआ, जिसमें “स्टेनिंग की तीव्रता और वितरण, दोनों शामिल थे”, और आज इसका उपयोग कई न्यूक्लियर, साइटोप्लाज़्मिक और मेम्ब्रेन मार्कर के लिए होता है।

यह संख्या क्या बता सकती है और क्या नहीं

• अलग स्लाइड, एक ही स्कोर: 100 % कमज़ोर कोशिकाएँ और 33 % तीव्र कोशिकाएँ, दोनों से लगभग 100 मिलता है। H-score के साथ पॉज़िटिव प्रतिशत, या हर तीव्रता पर प्रतिशत, भी बताएँ।
• कोई सार्वभौमिक कट-ऑफ़ नहीं: कौन-सा स्कोर “उच्च” या “पॉज़िटिव” माना जाए, यह मार्कर, एंटीबॉडी, एसे (assay) और अध्ययन पर निर्भर करता है। थ्रेशोल्ड उस पेपर या गाइडलाइन से लें जिसका आप पालन कर रहे हैं, और उसे स्पष्ट रूप से लिखें।
• आँख से तीव्रता आँकना व्यक्तिपरक है: कमज़ोर कहाँ ख़त्म होता है और मध्यम कहाँ शुरू होता है, यह अलग-अलग पर्यवेक्षकों के लिए अलग होता है। उसी रन में स्टेन किए गए कंट्रोल के आधार पर स्कोर करें, और स्लाइडों के एक सैंपल को किसी दूसरे व्यक्ति से भी स्कोर करवाएँ।
• सही कोशिकाएँ स्कोर करें: केवल उसी कोशिका समूह को गिनें जिसमें मार्कर पढ़ा जाता है, और स्ट्रोमा, लिम्फ़ोसाइट, नेक्रोसिस और किनारे के आर्टिफ़ैक्ट को बाहर रखें, जब तक आपका प्रोटोकॉल कुछ और न कहे।
• पर्याप्त कोशिकाएँ गिनें: कुछ दर्जन कोशिकाओं से निकला स्कोर हर एक कोशिका के साथ काफ़ी बदल जाता है। प्रतिनिधि फ़ील्ड में कई सौ कोशिकाएँ एक आम न्यूनतम सीमा है।

सॉफ़्टवेयर से वही स्कोर पाना

इमेज विश्लेषण सॉफ़्टवेयर इन्हीं स्कोर तक उसी गणित से पहुँचता है, बस आँख की जगह माप ले लेता है। यह क्षेत्र के हर न्यूक्लियस को ढूँढता है, कलर डीकॉन्वोल्यूशन से भूरे DAB स्टेन को नीले हेमाटॉक्सिलिन से अलग करता है, हर न्यूक्लियस की औसत DAB ऑप्टिकल डेंसिटी मापता है, और आपके तय किए थ्रेशोल्ड के आधार पर उसे ग्रेड करता है: पॉज़िटिव या नेगेटिव के लिए एक थ्रेशोल्ड, 1+, 2+ और 3+ के लिए तीन।

• QuPath (मुफ़्त, ओपन सोर्स): एक थ्रेशोल्ड के साथ Positive cell detection पॉज़िटिव प्रतिशत देता है; तीन थ्रेशोल्ड के साथ यह H-score भी बताता है।
• Fiji / ImageJ (मुफ़्त): H DAB वेक्टर के साथ Colour Deconvolution, फिर थ्रेशोल्ड और गिनती; स्कोरिंग का गणित आपको ख़ुद करना होता है।
• SlideScope: आपके चुने हुए क्षेत्र में न्यूक्लियस गिनता है, हर एक को ग्रेड करता है, और QuPath जैसी ही परिभाषाओं का उपयोग करके पॉज़िटिव प्रतिशत, H-score और Allred स्कोर एक साथ बताता है। आप Ask Your Slide से सामान्य भाषा में भी पूछ सकते हैं; हर संख्या लोकल टूल से आती है, जाँचने के लिए आउटलाइन के साथ। केवल रिसर्च उपयोग के लिए।

आप जो भी इस्तेमाल करें, थ्रेशोल्ड आपके अपने चुनाव हैं: उन्हें अपने methods में लिखें, आउटलाइन को इमेज से मिलाकर जाँचें, और जिन स्लाइडों की आप तुलना कर रहे हैं उन सब पर उन्हें स्थिर रखें। चरण-दर-चरण: IHC स्टेनिंग को कैसे मापें।

प्रश्न

स्रोत

• McCarty KS Jr et al. Use of a monoclonal anti-estrogen receptor antibody in the immunohistochemical evaluation of human tumors. Cancer Res 1986;46(8 Suppl):4244s-4248s (HSCORE का मूल स्रोत)
• Wen Z et al. Deep learning-based H-score quantification of immunohistochemistry-stained images. Mod Pathol 2023 (फ़ॉर्मूला और 0 से 300 की रेंज)
• QuPath दस्तावेज़ीकरण: कोशिका वर्गीकरण, तीव्रता थ्रेशोल्ड और H-score

ये कैलकुलेटर रिसर्च और शिक्षण के लिए गणना करते हैं। ये निदान का टूल नहीं हैं: मरीज़ की देखभाल के लिए स्कोरिंग मान्य (validated) एसे, उस मार्कर की मौजूदा गाइडलाइन और पैथोलॉजिस्ट के निर्णय के अनुसार होती है।