IHC 評分

H-score 計算器

輸入各染色強度的細胞百分比,或您計數的細胞數,即可得到 0 到 300 範圍內的 H-score 以及陽性百分比。以下說明公式、計算範例、這個數字能告訴您什麼與不能告訴您什麼,以及影像分析軟體如何得出相同的分數。

H-score 計算器

依百分比

H-score—
陽性百分比(任何強度)—
陰性百分比—

—

依細胞計數

H-score—
陽性百分比—
各強度的細胞—
同一批細胞的 Allred 分數—
計數的細胞數—

H-score 的計算方式

H-score(histoscore,組織化學分數)把兩件事合為一個數字:有多少細胞染色,以及染色有多強。受評族群中的每個細胞(通常是腫瘤細胞)分為 0(陰性)、1+(弱)、2+(中度)或 3+(強)。將每個等級的細胞百分比乘以該等級,再把三個乘積相加。

H-score = 1 ×(1+ 細胞 %)+ 2 ×(2+ 細胞 %)+ 3 ×(3+ 細胞 %)

計算範例:30 % 的細胞弱染色、20 % 中度染色、10 % 強染色;其餘 40 % 為陰性。H-score = 30 × 1 + 20 × 2 + 10 × 3 = 100,陽性細胞佔 60 %。以細胞數計算也是同樣的加總:400 個細胞中,120 個弱、80 個中度、40 個強,得到 (120 + 160 + 120) ÷ 400 × 100 = 100。

此分數於 1980 年代針對雌激素受體染色提出,是一種「同時納入染色強度與分布」的評估,如今已用於許多細胞核、細胞質與細胞膜標記。

這個數字能告訴您什麼,不能告訴您什麼

  • 不同的玻片,相同的分數:100 % 弱陽性細胞與 33 % 強陽性細胞都會得到約 100 分。請在 H-score 旁一併回報陽性百分比,或各強度的百分比。
  • 沒有通用的切點:多少分算是「高」或「陽性」,取決於標記、抗體、檢測與研究本身。請採用您所依循的論文或指引中的閾值,並加以註明。
  • 肉眼判讀強度帶有主觀性:弱與中度的界線因觀察者而異。請以同一染色批次的對照組織為基準評分,並請第二位判讀者為部分玻片評分。
  • 為正確的細胞評分:只計數判讀該標記的細胞族群;除非您的實驗方案另有規定,否則排除間質、淋巴球、壞死與邊緣假影。
  • 計數足夠的細胞:只由幾十個細胞得出的分數,每多一個或少一個細胞都會大幅變動。在具代表性的視野中計數數百個細胞,是常見的最低要求。

用軟體得到相同的分數

影像分析軟體以相同的算術得出這些分數,只是以量測取代肉眼判讀。軟體會找出區域內的每個細胞核,以顏色反卷積將棕色的 DAB 染色與藍色的蘇木素分開,量測每個細胞核的平均 DAB 光密度,再依您設定的閾值分級:一個閾值區分陽性與陰性,三個閾值區分 1+、2+ 與 3+。

  • QuPath(免費、開源):Positive cell detection 使用一個閾值時提供陽性百分比;使用三個閾值時也會回報 H-score。
  • Fiji / ImageJ(免費):以 H DAB 向量執行 Colour Deconvolution,再設定閾值並計數;評分的算術需由您自行完成。
  • SlideScope:在您選擇的區域內計數細胞核,為每個細胞核分級,並同時回報陽性百分比、H-score 與 Allred 分數,採用與 QuPath 相同的定義。您也可以透過 Ask Your Slide 以日常用語提問;每個數字都來自本機工具,並附有可供核對的輪廓。僅供研究使用。

無論使用哪一種工具,閾值都是您的選擇:請寫入方法章節、對照影像檢查輪廓,並在要相互比較的所有玻片上維持不變。逐步說明:如何定量 IHC 染色。

常見問題

如何計算 H-score?

將弱染色細胞的百分比乘以 1、中度染色細胞乘以 2、強染色細胞乘以 3,再把三者相加。若弱 30 %、中度 20 %、強 10 %,H-score 為 30 + 40 + 30 = 100。

H-score 的範圍是多少?

0 到 300。0 分表示沒有細胞染色;300 分表示每個細胞都強染色(100 % × 3)。

H-score 多少算陽性?

沒有通用的切點。閾值取決於標記、抗體與檢測,以及您所依循的研究或指引,因此請從該來源取得閾值,並與結果一併回報。

H-score 與 Allred 分數有什麼不同?

兩者都結合了染色細胞的多寡與染色的強弱。H-score 依各強度的百分比加權,範圍為 0 到 300。Allred 分數則將比例分數(0 到 5)加上一個平均強度分數(0 到 3),範圍為 0 到 8。

軟體可以計算 H-score 嗎?

可以。在 Positive cell detection 中設定三個強度閾值時,QuPath 會回報 H-score;SlideScope 則以相同定義回報一個區域的陽性百分比、H-score 與 Allred 分數。兩者都依每個細胞核的平均 DAB 光密度分級,因此您所選的閾值應寫入方法章節。

這個計算器是免費的嗎?

是的。它在您的瀏覽器中執行,不會將任何資料傳送到任何地方。SlideScope 是由同一團隊開發的桌面顯微影像與病理應用程式,屬於付費應用程式,提供免費範例庫(可使用所有工具),並以訂閱方式開放您自己的影像。

資料來源

這些計算器只為研究與教學進行算術。它們不是診斷工具:用於病人照護的評分,應依循經過確效的檢測、該標記的現行指引,以及病理科醫師的判斷。

直接為玻片評分,不必手動計數

SlideScope 在您自己的電腦上計數玻片某個區域內的細胞核,依 DAB 染色為每個細胞核分級,並回報陽性百分比、H-score 與 Allred 分數,附有可供核對的輪廓。也可以直接輸入問題:Ask Your Slide 會執行相同的工具並呈現依據。僅供研究使用。先用內建範例免費試用所有工具;開啟您自己的影像需要訂閱。已經決定了嗎?立即訂閱。

下載 SlideScope