Kalkulator H-score

Kalkulator H-score

Cara menghitung H-score

H-score (histoscore) menggabungkan dua hal dalam satu angka: berapa banyak sel yang terwarnai dan seberapa kuat. Setiap sel dalam populasi yang Anda nilai, biasanya sel tumor, diberi grade 0 (negatif), 1+ (lemah), 2+ (sedang), atau 3+ (kuat). Persentase sel pada setiap grade dikalikan dengan grade tersebut, lalu ketiga hasil kalinya dijumlahkan.

H-score = 1 × (% sel 1+) + 2 × (% sel 2+) + 3 × (% sel 3+)

Contoh perhitungan: 30 % sel terwarnai lemah, 20 % sedang, dan 10 % kuat; 40 % sisanya negatif. H-score = 30 × 1 + 20 × 2 + 10 × 3 = 100, dengan 60 % sel positif. Dari jumlah sel, penjumlahannya sama: dari 400 sel, 120 lemah, 80 sedang, dan 40 kuat menghasilkan (120 + 160 + 120) ÷ 400 × 100 = 100.

Skor ini diperkenalkan untuk pewarnaan reseptor estrogen pada tahun 1980-an, sebagai evaluasi yang “memadukan intensitas dan distribusi pewarnaan”, dan kini digunakan untuk banyak penanda inti, sitoplasma, dan membran.

Apa yang dapat dan tidak dapat disampaikan oleh angka ini

• Slide berbeda, skor sama: 100 % sel lemah dan 33 % sel kuat sama-sama menghasilkan sekitar 100. Laporkan persen positif, atau persentase pada setiap intensitas, di samping H-score.
• Tidak ada cut-off universal: skor yang dianggap “tinggi” atau “positif” bergantung pada penanda, antibodi, assay, dan studinya. Ambil ambang dari makalah atau pedoman yang Anda ikuti, dan nyatakan ambang tersebut.
• Intensitas yang dinilai dengan mata bersifat subjektif: batas antara lemah dan sedang berbeda antarpengamat. Lakukan penilaian terhadap kontrol yang diwarnai dalam run yang sama, dan minta pembaca kedua menilai sebagian sampel slide.
• Nilai sel yang tepat: hitung hanya populasi sel tempat penanda dibaca, dan kecualikan stroma, limfosit, nekrosis, dan artefak tepi, kecuali protokol Anda menyatakan lain.
• Hitung sel dalam jumlah cukup: skor dari beberapa puluh sel bergeser banyak dengan setiap sel. Beberapa ratus sel dari bidang yang representatif adalah batas minimum yang umum.

Mendapatkan skor yang sama dari perangkat lunak

Perangkat lunak analisis citra mencapai skor ini dengan aritmetika yang sama, hanya saja mata digantikan oleh pengukuran. Perangkat lunak menemukan setiap inti dalam region, memisahkan pewarnaan DAB cokelat dari hematoksilin biru dengan dekonvolusi warna, mengukur densitas optik DAB rata-rata setiap inti, dan memberi grade terhadap ambang yang Anda tetapkan: satu ambang untuk positif atau negatif, tiga untuk 1+, 2+, dan 3+.

• QuPath (gratis, open source): Positive cell detection dengan satu ambang memberikan persen positif; dengan tiga ambang, alat ini juga melaporkan H-score.
• Fiji / ImageJ (gratis): Colour Deconvolution dengan vektor H DAB, lalu threshold dan hitung; aritmetika skoringnya Anda kerjakan sendiri.
• SlideScope: menghitung inti di region yang Anda pilih, memberi grade masing-masing, dan melaporkan persen positif, H-score, dan skor Allred sekaligus, dengan definisi yang sama dengan QuPath. Anda juga dapat bertanya dalam bahasa sehari-hari dengan Ask Your Slide; setiap angka berasal dari alat lokal, dengan garis batas untuk diperiksa. Hanya untuk penggunaan riset.

Apa pun yang Anda gunakan, ambang adalah pilihan: tuliskan di bagian metode, periksa garis batas terhadap citra, dan pertahankan ambang yang sama di seluruh slide yang Anda bandingkan. Langkah demi langkah: cara mengkuantifikasi pewarnaan IHC.

Pertanyaan

Sumber

• McCarty KS Jr et al. Use of a monoclonal anti-estrogen receptor antibody in the immunohistochemical evaluation of human tumors. Cancer Res 1986;46(8 Suppl):4244s-4248s (asal HSCORE)
• Wen Z et al. Deep learning-based H-score quantification of immunohistochemistry-stained images. Mod Pathol 2023 (rumus dan rentang 0 sampai 300)
• Dokumentasi QuPath: klasifikasi sel, ambang intensitas, dan H-score

Kalkulator ini melakukan aritmetika untuk riset dan pengajaran. Kalkulator ini bukan alat diagnostik: skoring untuk perawatan pasien mengikuti assay yang tervalidasi, pedoman terkini untuk penanda tersebut, dan penilaian seorang patolog.