H-score 계산 방법
H-score(histoscore)는 염색된 세포가 얼마나 많은지와 얼마나 강하게 염색되었는지를 하나의 숫자로 나타냅니다. 점수를 매기는 세포 집단(대개 종양 세포)의 각 세포를 0(음성), 1+(약양성), 2+(중등도 양성), 3+(강양성)으로 등급화합니다. 각 등급의 세포 비율에 해당 등급을 곱하고, 세 곱을 더합니다.
H-score = 1 × (1+ 세포 %) + 2 × (2+ 세포 %) + 3 × (3+ 세포 %)
계산 예시: 세포의 30 %가 약양성, 20 %가 중등도 양성, 10 %가 강양성이고 나머지 40 %는 음성입니다. H-score = 30 × 1 + 20 × 2 + 10 × 3 = 100이며, 양성 세포는 60 %입니다. 세포 수로 계산해도 합은 같습니다. 세포 400개 중 약양성 120개, 중등도 양성 80개, 강양성 40개라면 (120 + 160 + 120) ÷ 400 × 100 = 100입니다.
이 점수는 1980년대에 에스트로겐 수용체 염색을 위해 “염색의 강도와 분포를 모두 반영한” 평가법으로 도입되었으며, 지금은 여러 핵, 세포질, 세포막 마커에 쓰입니다.
이 숫자로 알 수 있는 것과 알 수 없는 것
- 다른 슬라이드, 같은 점수: 세포 100 %가 약양성인 경우와 세포 33 %가 강양성인 경우 모두 약 100이 됩니다. H-score와 함께 양성률이나 강도별 비율을 보고하세요.
- 보편적인 기준값은 없습니다: 어떤 점수를 “높음” 또는 “양성”으로 볼지는 마커, 항체, 분석법, 연구에 따라 다릅니다. 따르는 논문이나 가이드라인에서 기준값을 가져오고, 이를 명시하세요.
- 육안 강도 판정은 주관적입니다: 약양성과 중등도 양성의 경계는 관찰자마다 다릅니다. 같은 염색 배치에서 염색한 대조군과 비교해 점수를 매기고, 슬라이드 일부는 두 번째 판독자에게도 점수를 매기게 하세요.
- 올바른 세포에 점수 매기기: 마커를 판독하는 세포 집단만 세고, 프로토콜에서 달리 정하지 않는 한 간질, 림프구, 괴사, 가장자리 인공물은 제외하세요.
- 충분한 수의 세포 세기: 수십 개 세포로 얻은 점수는 세포 하나마다 크게 달라집니다. 대표 시야들에서 수백 개 세포를 세는 것이 흔히 쓰이는 최소 기준입니다.
소프트웨어로 같은 점수 얻기
이미지 분석 소프트웨어도 같은 계산으로 이 점수를 구하며, 눈 대신 측정값을 사용합니다. 영역 안의 모든 핵을 찾고, 컬러 디컨볼루션으로 갈색 DAB 염색과 파란색 헤마톡실린을 분리하고, 각 핵의 평균 DAB 광학 밀도를 측정한 다음, 사용자가 정한 임계값으로 등급을 매깁니다. 양성과 음성을 나누는 데는 임계값 하나, 1+, 2+, 3+를 나누는 데는 임계값 세 개를 씁니다.
- QuPath(무료, 오픈 소스): 임계값 하나로 Positive cell detection을 실행하면 양성률을, 임계값 세 개로 실행하면 H-score도 보고합니다.
- Fiji / ImageJ(무료): H DAB 벡터로 Colour Deconvolution을 실행한 다음 임계값을 적용해 계수합니다. 점수 계산은 직접 해야 합니다.
- SlideScope: 선택한 영역의 핵을 계수하고 각 핵에 등급을 매겨, QuPath와 같은 정의로 양성률, H-score, Allred 점수를 함께 보고합니다. Ask Your Slide로 일상 언어로 질문할 수도 있으며, 모든 숫자는 로컬 도구에서 나오고 확인할 수 있는 윤곽선이 함께 표시됩니다. 연구용으로만 사용하세요.
어떤 도구를 쓰든 임계값은 사용자가 정하는 값입니다. 논문의 방법(Methods) 항목에 기재하고, 윤곽선을 이미지와 대조해 확인하고, 비교하는 슬라이드 전체에서 고정하세요. 단계별 안내는 IHC 염색 정량 방법을 참고하세요.
질문
H-score는 어떻게 계산하나요?
약양성 세포 비율에 1, 중등도 양성 세포 비율에 2, 강양성 세포 비율에 3을 곱한 다음 세 값을 더합니다. 약양성 30 %, 중등도 양성 20 %, 강양성 10 %라면 H-score는 30 + 40 + 30 = 100입니다.
H-score의 범위는 얼마인가요?
0~300입니다. 0은 염색된 세포가 없다는 뜻이고, 300은 모든 세포가 강양성이라는 뜻입니다(100 % × 3).
H-score가 얼마면 양성인가요?
보편적인 기준값은 없습니다. 기준값은 마커, 항체와 분석법, 따르는 연구나 가이드라인에 따라 달라지므로, 그 출처에서 기준값을 가져와 결과와 함께 보고하세요.
H-score와 Allred 점수는 어떻게 다른가요?
둘 다 얼마나 많은 세포가 얼마나 강하게 염색되는지를 결합합니다. H-score는 각 강도의 비율에 가중치를 두며 0~300 범위입니다. Allred 점수는 비율 점수(0~5)에 하나의 평균 강도 점수(0~3)를 더하며 0~8 범위입니다.
소프트웨어로 H-score를 계산할 수 있나요?
네. QuPath는 Positive cell detection에서 강도 임계값 세 개를 설정하면 H-score를 보고하고, SlideScope는 같은 정의로 영역의 양성률, H-score, Allred 점수를 보고합니다. 둘 다 각 핵의 평균 DAB 광학 밀도로 등급을 매기므로, 선택한 임계값은 방법(Methods) 항목에 기재해야 합니다.
이 계산기는 무료인가요?
네. 브라우저에서 실행되며 어디에도 데이터를 보내지 않습니다. 같은 팀이 만든 데스크톱 현미경 및 병리 앱 SlideScope는 무료 샘플 라이브러리(모든 도구 포함)가 있는 유료 앱이며, 내 이미지를 열려면 구독이 필요합니다.
출처
- McCarty KS Jr et al. Use of a monoclonal anti-estrogen receptor antibody in the immunohistochemical evaluation of human tumors. Cancer Res 1986;46(8 Suppl):4244s-4248s (HSCORE)
- Wen Z et al. Deep learning-based H-score quantification of immunohistochemistry-stained images. Mod Pathol 2023 (공식 및 0~300 범위)
- QuPath 문서 — 세포 분류, 강도 임계값, H-score
이 계산기는 연구와 교육을 위한 계산을 수행합니다. 진단 도구가 아닙니다. 환자 진료를 위한 점수 산정은 검증된 분석법, 해당 마커의 최신 가이드라인, 그리고 병리의사의 판단을 따릅니다.
손으로 세는 대신 슬라이드에서 점수 산정하기
SlideScope는 슬라이드의 한 영역에서 핵을 계수하고, DAB 염색에 따라 각 핵에 등급을 매기며, 양성률, H-score, Allred 점수를 확인할 수 있는 윤곽선과 함께 내 컴퓨터에서 보고합니다. 질문을 입력할 수도 있습니다. Ask Your Slide가 같은 도구를 실행하고 근거를 보여 줍니다. 연구용으로만 사용하세요. 내장 샘플에서 모든 도구를 무료로 사용해 볼 수 있으며, 내 이미지를 열려면 구독이 필요합니다. 이미 결정하셨나요? 지금 구독하기.