Cultivo celular
Calculadora de siembra celular
Elige la placa o el frasco, ingresa la concentración de células y la densidad de siembra, y obtén el número de células por pocillo, cuánta suspensión celular y cuánto medio mezclar, y qué va en cada pocillo. Las áreas de crecimiento vienen completadas para los recipientes más comunes y se pueden editar, porque varían un poco entre fabricantes.
Cómo funciona el cálculo de siembra
células por pocillo = densidad × área · suspensión = células por pocillo × pocillos ÷ concentración · medio = volumen por pocillo × pocillos − suspensión
Ejemplo resuelto: sembrar una placa de 96 pocillos a 20,000 células/cm² a partir de una suspensión de 1 × 10⁶ células/mL, con 100 µL por pocillo y un 10 % extra. Cada pocillo mide 0.32 cm², así que son 6,400 células por pocillo. 96 pocillos × 1.1 = el equivalente a 105.6 pocillos: 675,840 células, que corresponden a 0.676 mL de suspensión. El volumen total es 10.56 mL, así que agrega 9.88 mL de medio, mezcla y pon 100 µL en cada pocillo.
Si la suspensión sola supera el volumen final, el stock está demasiado diluido para esa densidad: centrifuga las células, resuspéndelas en menos medio y vuelve a contar.
Áreas de crecimiento y volúmenes típicos
| Recipiente | Área de crecimiento | Medio | Siembra típica (HeLa) |
|---|---|---|---|
| Placa de 6 pocillos | 9.6 cm² | 1–3 mL | 0.3 × 10⁶ por pocillo |
| Placa de 12 pocillos | 3.5 cm² | 1–2 mL | 0.1 × 10⁶ por pocillo |
| Placa de 24 pocillos | 1.9 cm² | 0.5–1 mL | 0.05 × 10⁶ por pocillo |
| Placa de 48 pocillos | 1.1 cm² | 0.2–0.4 mL | 0.03 × 10⁶ por pocillo |
| Placa de 96 pocillos | 0.32 cm² | 0.1–0.2 mL | 0.01 × 10⁶ por pocillo |
| Placa de 384 pocillos | 0.084 cm² | ~0.08 mL | 0.0018 × 10⁶ por pocillo |
| Placa de Petri de 35 / 60 / 100 mm | 8.8 / 21.5 / 56.7 cm² | 2 / 5 / 12 mL | 0.3 / 0.8 / 2.2 × 10⁶ |
| Frasco T-25 / T-75 / T-175 | 25 / 75 / 175 cm² | 3–5 / 8–15 / 35–53 mL | 0.7 / 2.1 / 4.9 × 10⁶ |
Valores de la tabla de referencia de cultivo celular de Thermo Fisher (recipientes Nunc). Otras marcas difieren ligeramente; por ejemplo, un pocillo de placa de 6 pocillos de Corning mide 9.5 cm²; el campo de área de arriba se puede editar. La densidad adecuada depende de la línea celular y de cuándo quieres que el cultivo llegue a confluencia, así que toma las cifras de HeLa como punto de partida.
Sembrar de forma uniforme
- Cuenta con un hemocitómetro o un contador automático justo antes de sembrar, y usa la concentración de células vivas.
- Mantén la mezcla en suspensión: inviértela o pipetéala entre filas, porque las células se asientan en cuestión de minutos.
- Deja reposar la placa recién sembrada sobre una superficie plana a temperatura ambiente durante 15–30 minutos antes de llevarla a la incubadora, para reducir la acumulación en los bordes.
- Para imagenología, toma imágenes de algunos campos por pocillo y verifica la densidad en ellas: con una imagen calibrada, las células por mm² salen directamente de un conteo.
Preguntas
¿Cómo calculo las células por pocillo?
Multiplica la densidad de siembra en células por cm² por el área de crecimiento de un pocillo. Un pocillo de placa de 96 pocillos mide unos 0.32 cm², así que 20,000 células/cm² equivalen a 6,400 células por pocillo.
¿Cuánta suspensión celular necesito?
Células totales necesarias ÷ concentración celular. Para 96 pocillos de 6,400 células (más un 10 % extra) a partir de 1 × 10⁶ células/mL, son 675,840 ÷ 1,000,000 ≈ 0.68 mL, completados con medio hasta el volumen final.
¿Es lo mismo que C1V1 = C2V2?
Sí. La calculadora resuelve C1 × V1 = C2 × V2 para células: C1 es la concentración de tu stock, C2 la concentración de la mezcla de siembra (células por pocillo ÷ volumen por pocillo), V2 el volumen total y V1 la suspensión que hay que tomar.
¿Cuál es el área de superficie de un pocillo de placa de 96 pocillos?
Unos 0.32 cm² para un pocillo estándar de fondo plano (Thermo Fisher y Corning indican 0.32 cm²); las placas de 96 pocillos de media área tienen unos 0.16 cm².
¿Esta calculadora es gratuita?
Sí. Funciona en tu navegador y no envía nada a ninguna parte. SlideScope, la aplicación de microscopía de escritorio creada por el mismo equipo, es una aplicación de pago con una biblioteca de muestras gratuita (con todas las herramientas) y una suscripción para tus propias imágenes.
Fuentes
Los resultados son teóricos o aritméticos; compáralos con la documentación de tu instrumento antes de confiar en ellos para trabajo clínico o regulado.
Mide en tus imágenes reales
SlideScope abre 34 formatos de microscopio y de escáner de láminas, entre ellos CZI, ND2, SVS y LIF, con su propia calibración, así que las longitudes, áreas, conteos de células y barras de escala salen en µm sin configurar nada. Prueba gratis todas las herramientas con las muestras incluidas; abrir tus propias imágenes requiere una suscripción. ¿Ya lo decidiste? Suscríbete ahora.