接种计算原理
每孔细胞数 = 密度 × 面积 · 悬液 = 每孔细胞数 × 孔数 ÷ 浓度 · 培养基 = 每孔体积 × 孔数 − 悬液
示例：用 1 × 10⁶ 细胞/mL 的悬液以 20,000 细胞/cm² 接种一块 96 孔板，每孔 100 µL，余量 10 %。每孔面积 0.32 cm²，因此每孔 6,400 个细胞。96 孔 × 1.1 = 105.6 孔的用量：675,840 个细胞，即 0.676 mL 悬液。总体积为 10.56 mL，因此加入 9.88 mL 培养基，混匀后每孔加 100 µL。
如果仅悬液体积就超过最终体积，说明储备液浓度太低，无法达到该密度：请离心沉淀细胞，用更少的培养基重悬，然后重新计数。
生长面积与典型体积
| 培养器皿 | 生长面积 | 培养基 | 典型接种量（HeLa） |
|---|---|---|---|
| 6 孔板 | 9.6 cm² | 1–3 mL | 每孔 0.3 × 10⁶ |
| 12 孔板 | 3.5 cm² | 1–2 mL | 每孔 0.1 × 10⁶ |
| 24 孔板 | 1.9 cm² | 0.5–1 mL | 每孔 0.05 × 10⁶ |
| 48 孔板 | 1.1 cm² | 0.2–0.4 mL | 每孔 0.03 × 10⁶ |
| 96 孔板 | 0.32 cm² | 0.1–0.2 mL | 每孔 0.01 × 10⁶ |
| 384 孔板 | 0.084 cm² | ~0.08 mL | 每孔 0.0018 × 10⁶ |
| 35 / 60 / 100 mm 培养皿 | 8.8 / 21.5 / 56.7 cm² | 2 / 5 / 12 mL | 0.3 / 0.8 / 2.2 × 10⁶ |
| T-25 / T-75 / T-175 培养瓶 | 25 / 75 / 175 cm² | 3–5 / 8–15 / 35–53 mL | 0.7 / 2.1 / 4.9 × 10⁶ |
数值来自 Thermo Fisher 的细胞培养参考表（Nunc 培养器皿）。其他品牌略有不同，例如 Corning 6 孔板为 9.5 cm²；上方的面积字段可以修改。合适的密度取决于细胞系以及您希望培养物何时达到汇合，因此请把 HeLa 的数值当作起点。
均匀接种
- 在接种前用血细胞计数板或自动计数仪计数，并使用活细胞浓度。
- 保持混合液处于悬浮状态：在加样各行之间颠倒混匀或用移液器吹打，因为细胞几分钟内就会沉降。
- 刚接种的培养板先在室温下平放 15–30 分钟再放入培养箱，以减少边缘聚集。
- 用于成像时，每孔拍摄几个视野并在图像上检查密度：使用校准过的图像，计数后即可直接得到每 mm² 的细胞数。
常见问题
如何计算每孔细胞数？
将以细胞/cm² 表示的接种密度乘以单孔生长面积。96 孔板每孔约 0.32 cm²，因此 20,000 细胞/cm² 即每孔 6,400 个细胞。
需要多少细胞悬液？
所需细胞总数 ÷ 细胞浓度。对于 96 孔、每孔 6,400 个细胞（另加 10 % 余量），使用 1 × 10⁶ 细胞/mL 的悬液，即 675,840 ÷ 1,000,000 ≈ 0.68 mL，再用培养基补足至最终体积。
这和 C1V1 = C2V2 是一回事吗？
是的。计算器针对细胞求解 C1 × V1 = C2 × V2：C1 是储备液浓度，C2 是接种混合液的浓度（每孔细胞数 ÷ 每孔体积），V2 是总体积，V1 是需吸取的悬液量。
96 孔板每孔的表面积是多少？
标准平底孔约为 0.32 cm²（Thermo Fisher 和 Corning 均标注为 0.32 cm²）；半面积 96 孔板约为 0.16 cm²。
这个计算器免费吗？
是的。它在您的浏览器中运行，不会向任何地方发送数据。SlideScope 是同一团队开发的桌面显微镜应用，它是一款付费应用，附带免费示例库（包含所有工具），打开您自己的图像需要订阅。
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