接種計算的原理
每孔細胞數 = 密度 × 面積 · 懸浮液 = 每孔細胞數 × 孔數 ÷ 濃度 · 培養基 = 每孔體積 × 孔數 − 懸浮液
計算範例：以 1 × 10⁶ cells/mL 的懸浮液，按 20,000 cells/cm² 接種一塊 96 孔盤，每孔 100 µL，另加 10 %。每孔面積為 0.32 cm²，因此每孔 6,400 個細胞。96 孔 × 1.1 = 105.6 孔的量：675,840 個細胞，即 0.676 mL 懸浮液。總體積為 10.56 mL，因此加入 9.88 mL 培養基，混勻後每孔加入 100 µL。
如果單是懸浮液就超過最終體積，表示原液濃度對該密度而言太稀：請將細胞離心沉澱，以較少的培養基重新懸浮，然後再計數一次。
生長面積與典型體積
| 容器 | 生長面積 | 介質 | 典型接種量（HeLa） |
|---|---|---|---|
| 6 孔盤 | 9.6 cm² | 1–3 mL | 每孔 0.3 × 10⁶ |
| 12 孔盤 | 3.5 cm² | 1–2 mL | 每孔 0.1 × 10⁶ |
| 24 孔盤 | 1.9 cm² | 0.5–1 mL | 每孔 0.05 × 10⁶ |
| 48 孔盤 | 1.1 cm² | 0.2–0.4 mL | 每孔 0.03 × 10⁶ |
| 96 孔盤 | 0.32 cm² | 0.1–0.2 mL | 每孔 0.01 × 10⁶ |
| 384 孔盤 | 0.084 cm² | ~0.08 mL | 每孔 0.0018 × 10⁶ |
| 35 / 60 / 100 mm 培養皿 | 8.8 / 21.5 / 56.7 cm² | 2 / 5 / 12 mL | 0.3 / 0.8 / 2.2 × 10⁶ |
| T-25 / T-75 / T-175 培養瓶 | 25 / 75 / 175 cm² | 3–5 / 8–15 / 35–53 mL | 0.7 / 2.1 / 4.9 × 10⁶ |
數值取自 Thermo Fisher 的細胞培養參考表（Nunc 容器）。其他品牌略有不同，例如 Corning 6 孔盤為 9.5 cm²；上方的面積欄位可以編輯。適當的密度取決於細胞株，以及您希望培養物何時達到滿盤，因此請將 HeLa 的數值視為起點。
均勻接種
- 在接種前用血球計數盤或自動計數器計數，並使用活細胞濃度。
- 讓混合液保持懸浮：在各排之間倒轉或吹打混勻，因為細胞在幾分鐘內就會沉降。
- 剛接種好的孔盤先在室溫下平放 15–30 分鐘再放入培養箱，以減少細胞擠在邊緣。
- 若用於影像擷取，每孔拍攝幾個視野，並在影像上確認密度：有了校正過的影像，每 mm² 細胞數可直接由計數得出。
常見問題
如何計算每孔細胞數？
將接種密度（每 cm² 細胞數）乘以單孔的生長面積。96 孔盤的單孔面積約為 0.32 cm²，因此 20,000 cells/cm² 即為每孔 6,400 個細胞。
我需要多少細胞懸浮液？
所需細胞總數 ÷ 細胞濃度。以 1 × 10⁶ cells/mL 接種 96 孔、每孔 6,400 個細胞（另加 10 %）為例，即 675,840 ÷ 1,000,000 ≈ 0.68 mL，再以培養基補足至最終體積。
這和 C1V1 = C2V2 相同嗎？
是的。此計算器針對細胞求解 C1 × V1 = C2 × V2：C1 是您的原液濃度，C2 是接種混合液的濃度（每孔細胞數 ÷ 每孔體積），V2 是總體積，V1 則是需吸取的懸浮液量。
96 孔盤單孔的表面積是多少？
標準平底孔約為 0.32 cm²（Thermo Fisher 與 Corning 皆列為 0.32 cm²）；半面積 96 孔盤約為 0.16 cm²。
這個計算器是免費的嗎？
是的。它在您的瀏覽器中執行，不會將任何資料傳送到任何地方。SlideScope 是同一團隊開發的桌面顯微影像應用程式，為付費應用程式，附有免費範例庫（所有工具皆可使用），開啟您自己的影像則需要訂閱。
資料來源
結果為理論值或算術結果；用於臨床或受法規管制的工作之前，請先與儀器的說明文件核對。
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