Calcolatore del punteggio di Allred

Calcolatore del punteggio di Allred

La tabella del punteggio di Allred

Il punteggio di Allred è stato descritto per la colorazione dei recettori degli estrogeni e del progesterone nel carcinoma mammario. Somma due punteggi assegnati ai nuclei delle cellule tumorali.

Punteggio totale di Allred = punteggio di proporzione + punteggio di intensità (0, oppure da 2 a 8)

Esempio svolto: il 40 % dei nuclei tumorali è positivo, con colorazione mediamente intermedia. Il 40 % cade tra un terzo e due terzi, quindi il punteggio di proporzione è 4; l’intensità intermedia vale 2; il totale è 4 + 2 = 6.

Le tabelle pubblicate riportano i limiti delle fasce in modo leggermente diverso (il 10 % compare sia sotto 2 sia sotto 3). Questo calcolatore assegna un valore che cade esattamente su un limite alla fascia superiore: l’1 % vale 2, il 10 % vale 3, un terzo vale 4 e due terzi valgono 5, che è anche il modo in cui lo calcolano QuPath e SlideScope.

Cut-off pubblicati e che cosa usano oggi le linee guida

• Il cut-off originale: nella descrizione del 1998, un punteggio totale di 0 o 2 era letto come negativo e da 3 a 8 come positivo. Un totale di 3 richiede almeno l’1 % di cellule debolmente colorate.
• Le linee guida attuali sulla mammella riportano percentuali: l’aggiornamento ASCO/CAP del 2020 per il test dei recettori degli estrogeni e del progesterone legge come positivo dall’1 % al 100 % dei nuclei tumorali, come negativo meno dell’1 %, e riporta dall’1 % al 10 % come “ER Low Positive”. Molti referti indicano percentuale e intensità, con o senza un punteggio di Allred o un H-score.
• Una sola intensità per tutto il tumore: il punteggio di intensità è una media, quindi un insieme di cellule deboli e forti diventa “intermedio”. Usa l’H-score quando conta la distribuzione delle intensità.
• Altri marcatori: nella ricerca il punteggio viene talvolta preso in prestito per altri marcatori nucleari. Dichiara di averlo fatto e quale cut-off hai usato.

Ottenere lo stesso punteggio con un software

Il software di analisi d’immagine arriva a questi punteggi con la stessa aritmetica, sostituendo l’occhio con una misura. Trova ogni nucleo nella regione, separa la colorazione marrone del DAB da quella blu dell’ematossilina con la deconvoluzione del colore, misura la densità ottica DAB media di ogni nucleo e gli assegna un grado rispetto a soglie che imposti tu: una soglia per positivo o negativo, tre per 1+, 2+ e 3+.

• QuPath (gratuito, open source): la Positive cell detection con una soglia dà la percentuale di positivi; con tre soglie riporta anche l’H-score.
• Fiji / ImageJ (gratuito): Colour Deconvolution con i vettori H DAB, poi soglia e conteggio; l’aritmetica del punteggio spetta a te.
• SlideScope: conta i nuclei nella regione che scegli, assegna a ciascuno un grado e riporta insieme percentuale di positivi, H-score e punteggio di Allred, con le stesse definizioni di QuPath. Puoi anche fare la domanda in linguaggio semplice con Ask Your Slide; ogni numero proviene dallo strumento locale, con i contorni da controllare. Solo per uso di ricerca.

Qualunque strumento usi, le soglie sono scelte: scrivile nei metodi, confronta i contorni con l’immagine e mantienile fisse su tutti i vetrini che confronti. Passo per passo: come quantificare la colorazione IHC.

Domande

Fonti

• Allred DC, Harvey JM, Berardo M, Clark GM. Prognostic and predictive factors in breast cancer by immunohistochemical analysis. Mod Pathol 1998;11(2):155-168
• Allison KH et al. Estrogen and progesterone receptor testing in breast cancer: ASCO/CAP guideline update. Arch Pathol Lab Med 2020;144(5):545-563
• Documentazione di QuPath: classificazione delle cellule e soglie di intensità

Questi calcolatori eseguono calcoli per la ricerca e la didattica. Non sono uno strumento diagnostico: la valutazione per la cura del paziente segue il saggio validato, la linea guida attuale per quel marcatore e il giudizio di un patologo.