การให้คะแนน IHC
เครื่องคำนวณคะแนน Allred
กรอกเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่ให้ผลบวกและความเข้มเฉลี่ยของการติดสี เพื่อรับคะแนนสัดส่วน คะแนนความเข้ม และคะแนนรวมจาก 8 ของ Allred หรือกรอกจำนวนเซลล์ที่คุณนับได้ในแต่ละระดับความเข้ม แล้วให้เครื่องคำนวณหาทั้งสองส่วนให้ ตารางคะแนน ตัวอย่างการคำนวณ และจุดตัดที่มีการตีพิมพ์อยู่ด้านล่าง
ตารางคะแนน Allred
คะแนน Allred ถูกเสนอขึ้นสำหรับการย้อมตัวรับเอสโตรเจนและโปรเจสเตอโรนในมะเร็งเต้านม โดยรวมคะแนนสองส่วนที่ให้กับนิวเคลียสของเซลล์เนื้องอก
| คะแนนสัดส่วน | เซลล์ที่ให้ผลบวก | คะแนนความเข้ม | ความเข้มเฉลี่ยของการติดสี |
|---|---|---|---|
| 0 | ไม่มี | 0 | ไม่มี |
| 1 | น้อยกว่า 1 ใน 100 (ต่ำกว่า 1 %) | 1 | อ่อน |
| 2 | 1 ใน 100 ถึง 1 ใน 10 (1 % ถึง 10 %) | 2 | ปานกลาง |
| 3 | 1 ใน 10 ถึง 1 ใน 3 (10 % ถึง 33 %) | 3 | เข้ม |
| 4 | 1 ใน 3 ถึง 2 ใน 3 (33 % ถึง 67 %) | ||
| 5 | มากกว่า 2 ใน 3 (มากกว่า 67 %) |
คะแนนรวม Allred = คะแนนสัดส่วน + คะแนนความเข้ม (0 หรือ 2 ถึง 8)
ตัวอย่างการคำนวณ: นิวเคลียสของเซลล์เนื้องอก 40 % ให้ผลบวก โดยติดสีระดับปานกลางโดยเฉลี่ย 40 % อยู่ระหว่างหนึ่งในสามถึงสองในสาม คะแนนสัดส่วนจึงเป็น 4 ความเข้มปานกลางได้ 2 คะแนนรวมคือ 4 + 2 = 6
ตารางที่ตีพิมพ์ระบุขอบของแต่ละช่วงต่างกันเล็กน้อย (10 % ปรากฏทั้งในคะแนน 2 และ 3) เครื่องคำนวณนี้จัดค่าที่อยู่ตรงขอบพอดีไว้ในช่วงที่สูงกว่า: 1 % ได้ 2 คะแนน 10 % ได้ 3 หนึ่งในสามได้ 4 และสองในสามได้ 5 ซึ่งเป็นวิธีเดียวกับที่ QuPath และ SlideScope คำนวณ
จุดตัดที่มีการตีพิมพ์ และสิ่งที่แนวทางปัจจุบันใช้
- จุดตัดดั้งเดิม: ในคำอธิบายปี 1998 คะแนนรวม 0 หรือ 2 ถือเป็นผลลบ และ 3 ถึง 8 ถือเป็นผลบวก คะแนนรวม 3 ต้องมีเซลล์ติดสีอ่อนอย่างน้อย 1 %
- แนวทางปัจจุบันสำหรับมะเร็งเต้านมรายงานเป็นเปอร์เซ็นต์: ASCO/CAP ฉบับปรับปรุงปี 2020 สำหรับการตรวจตัวรับเอสโตรเจนและโปรเจสเตอโรน ถือว่านิวเคลียสเซลล์เนื้องอกที่ติดสี 1 % ถึง 100 % เป็นผลบวก ต่ำกว่า 1 % เป็นผลลบ และรายงาน 1 % ถึง 10 % เป็น “ER Low Positive” รายงานจำนวนมากระบุเปอร์เซ็นต์และความเข้ม โดยอาจมีหรือไม่มีคะแนน Allred หรือ H-score ประกอบ
- ความเข้มค่าเดียวสำหรับทั้งเนื้องอก: คะแนนความเข้มเป็นค่าเฉลี่ย เซลล์ที่ติดสีอ่อนปนกับเซลล์ที่ติดสีเข้มจึงกลายเป็น “ปานกลาง” ให้ใช้ H-score เมื่อการกระจายของความเข้มมีความสำคัญ
- มาร์กเกอร์อื่น: ในงานวิจัย บางครั้งมีการนำคะแนนนี้ไปใช้กับมาร์กเกอร์ในนิวเคลียสตัวอื่น ให้ระบุว่าคุณทำเช่นนั้นและใช้จุดตัดใด
ให้ซอฟต์แวร์คำนวณคะแนนเดียวกัน
ซอฟต์แวร์วิเคราะห์ภาพได้คะแนนเหล่านี้ด้วยการคำนวณแบบเดียวกัน เพียงแต่ใช้การวัดแทนสายตา ซอฟต์แวร์จะหานิวเคลียสทุกตัวในบริเวณ แยกสี DAB สีน้ำตาลออกจากฮีมาทอกซิลินสีน้ำเงินด้วย colour deconvolution วัดค่าเฉลี่ยความหนาแน่นเชิงแสงของ DAB ในนิวเคลียสแต่ละตัว และให้เกรดตามค่า threshold ที่คุณกำหนด: หนึ่งค่าสำหรับผลบวกหรือผลลบ และสามค่าสำหรับ 1+, 2+ และ 3+
- QuPath (ฟรี โอเพนซอร์ส): Positive cell detection ที่ใช้ threshold หนึ่งค่าให้เปอร์เซ็นต์ที่ให้ผลบวก และเมื่อใช้สามค่าจะรายงาน H-score ด้วย
- Fiji / ImageJ (ฟรี): Colour Deconvolution ด้วยเวกเตอร์ H DAB แล้วทำ threshold และนับ ส่วนการคำนวณคะแนนคุณต้องทำเอง
- SlideScope: นับนิวเคลียสในบริเวณที่คุณเลือก ให้เกรดแต่ละตัว และรายงานเปอร์เซ็นต์ที่ให้ผลบวก, H-score และคะแนน Allred พร้อมกัน โดยใช้นิยามเดียวกับ QuPath คุณยังถามด้วยภาษาทั่วไปผ่าน Ask Your Slide ได้ ทุกตัวเลขมาจากเครื่องมือบนเครื่อง พร้อมเส้นขอบให้ตรวจสอบ ใช้เพื่อการวิจัยเท่านั้น
ไม่ว่าจะใช้เครื่องมือใด ค่า threshold คือสิ่งที่คุณเลือกเอง: บันทึกไว้ในส่วนวิธีการ ตรวจเส้นขอบเทียบกับภาพ และใช้ค่าเดิมกับทุกสไลด์ที่นำมาเปรียบเทียบ ดูทีละขั้นตอนได้ที่วิธีวัดปริมาณการย้อม IHC
คำถาม
คะแนน Allred คำนวณอย่างไร
นำคะแนนสัดส่วน (0 ถึง 5 จากเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่ให้ผลบวก) บวกกับคะแนนความเข้ม (0 ถึง 3 คือความเข้มเฉลี่ยของการติดสีในเซลล์ที่ให้ผลบวก) เมื่อมีเซลล์ให้ผลบวก 40 % ที่ความเข้มปานกลาง คะแนนคือ 4 + 2 = 6
คะแนน Allred มีช่วงค่าเท่าไร
0 ถึง 8 เนื่องจากเซลล์ที่ให้ผลบวกทุกเซลล์ติดสีอย่างน้อยระดับอ่อน คะแนนรวม 1 จึงเกิดขึ้นไม่ได้ คะแนนรวมที่เป็นไปได้คือ 0 และ 2 ถึง 8
คะแนน Allred 8 หมายความว่าอะไร
เซลล์มากกว่าสองในสามให้ผลบวก (คะแนนสัดส่วน 5) และติดสีเข้มโดยเฉลี่ย (คะแนนความเข้ม 3) นี่คือคะแนนสูงสุดที่เป็นไปได้
คะแนน Allred เท่าไรจึงถือว่าให้ผลบวก
ในคำอธิบายดั้งเดิม คะแนนรวม 3 ขึ้นไปถือเป็นผลบวก และ 0 หรือ 2 เป็นผลลบ แนวทาง ASCO/CAP ปัจจุบันสำหรับมะเร็งเต้านมรายงานเปอร์เซ็นต์ของนิวเคลียสที่ให้ผลบวก โดยถือว่า 1 % ขึ้นไปเป็นผลบวก สำหรับการดูแลผู้ป่วย ให้ปฏิบัติตามแนวทางปัจจุบันและห้องปฏิบัติการที่ออกรายงาน
คะแนน Allred กับ H-score ต่างกันอย่างไร
คะแนน Allred ใช้ความเข้มเฉลี่ยค่าเดียวสำหรับเซลล์ที่ให้ผลบวกทั้งหมด และมีค่าตั้งแต่ 0 ถึง 8 ส่วน H-score ถ่วงน้ำหนักเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ในแต่ละระดับความเข้มแยกกัน และมีค่าตั้งแต่ 0 ถึง 300 จึงเก็บรายละเอียดของการติดสีแบบผสมได้มากกว่า
เครื่องคำนวณนี้ใช้ฟรีหรือไม่?
ฟรี เครื่องคำนวณทำงานในเบราว์เซอร์ของคุณและไม่ส่งข้อมูลไปที่ใดเลย SlideScope ซึ่งเป็นแอปเดสก์ท็อปสำหรับภาพกล้องจุลทรรศน์และพยาธิวิทยาจากทีมเดียวกัน เป็นแอปแบบชำระเงินที่มีคลังภาพตัวอย่างฟรี (ใช้ได้ทุกเครื่องมือ) และต้องสมัครสมาชิกสำหรับภาพของคุณเอง
แหล่งอ้างอิง
- Allred DC, Harvey JM, Berardo M, Clark GM. Prognostic and predictive factors in breast cancer by immunohistochemical analysis. Mod Pathol 1998;11(2):155-168
- Allison KH et al. Estrogen and progesterone receptor testing in breast cancer: ASCO/CAP guideline update. Arch Pathol Lab Med 2020;144(5):545-563
- เอกสาร QuPath: การจำแนกเซลล์และค่า threshold ความเข้ม
เครื่องคำนวณเหล่านี้ทำการคำนวณเพื่อการวิจัยและการเรียนการสอน ไม่ใช่เครื่องมือวินิจฉัย การให้คะแนนเพื่อการดูแลผู้ป่วยต้องเป็นไปตามวิธีทดสอบที่ผ่านการตรวจสอบความถูกต้อง (validated) แนวทางปัจจุบันสำหรับมาร์กเกอร์นั้น และวิจารณญาณของพยาธิแพทย์
ให้คะแนนสไลด์แทนการนับด้วยมือ
SlideScope นับนิวเคลียสในบริเวณหนึ่งของสไลด์ ให้เกรดแต่ละตัวตามการติดสี DAB และรายงานเปอร์เซ็นต์ที่ให้ผลบวก, H-score และคะแนน Allred พร้อมเส้นขอบให้ตรวจสอบ บนคอมพิวเตอร์ของคุณเอง หรือพิมพ์คำถาม: Ask Your Slide จะรันเครื่องมือชุดเดียวกันและแสดงหลักฐาน ใช้เพื่อการวิจัยเท่านั้น ลองใช้ทุกเครื่องมือฟรีกับภาพตัวอย่างในตัว การเปิดภาพของคุณเองต้องสมัครสมาชิก ตัดสินใจแล้วใช่ไหม สมัครสมาชิกเลย