Hodnocení IHC
Kalkulačka skóre Allred
Zadejte procento pozitivních buněk a jejich průměrnou intenzitu barvení a získáte skóre podílu, skóre intenzity a celkové skóre Allred z 8. Nebo zadejte buňky, které jste napočítali při každé intenzitě, a kalkulačka obě části určí sama. Tabulka skóre, řešený příklad a publikované hranice jsou níže.
Tabulka skóre Allred
Skóre Allred bylo popsáno pro barvení estrogenových a progesteronových receptorů u karcinomu prsu. Sčítá dvě skóre přidělená jádrům nádorových buněk.
| Skóre podílu | Pozitivní buňky | Skóre intenzity | Průměrné barvení |
|---|---|---|---|
| 0 | Žádné | 0 | Žádné |
| 1 | Méně než 1 ze 100 (pod 1 %) | 1 | Slabé |
| 2 | 1 ze 100 až 1 z 10 (1 % až 10 %) | 2 | Střední |
| 3 | 1 z 10 až 1 ze 3 (10 % až 33 %) | 3 | Silné |
| 4 | 1 ze 3 až 2 ze 3 (33 % až 67 %) | ||
| 5 | Více než 2 ze 3 (nad 67 %) |
Celkové skóre Allred = skóre podílu + skóre intenzity (0, nebo 2 až 8)
Řešený příklad: 40 % jader nádorových buněk je pozitivních, v průměru se střední intenzitou barvení. 40 % leží mezi jednou třetinou a dvěma třetinami, takže skóre podílu je 4; střední intenzitě odpovídá 2; celkem 4 + 2 = 6.
Publikované tabulky uvádějí hranice pásem mírně odlišně (10 % se objevuje u 2 i u 3). Tato kalkulačka zařazuje hodnotu ležící přesně na hranici do vyššího pásma: 1 % dává skóre 2, 10 % skóre 3, jedna třetina skóre 4 a dvě třetiny skóre 5; stejně to počítají i QuPath a SlideScope.
Publikované hranice a co dnes používají doporučení
- Původní hranice: v popisu z roku 1998 se celkové skóre 0 nebo 2 hodnotilo jako negativní a 3 až 8 jako pozitivní. Celkové skóre 3 vyžaduje alespoň 1 % slabě obarvených buněk.
- Současná doporučení pro karcinom prsu uvádějí procenta: aktualizace ASCO/CAP z roku 2020 pro testování estrogenových a progesteronových receptorů hodnotí 1 % až 100 % jader nádorových buněk jako pozitivní, méně než 1 % jako negativní a 1 % až 10 % uvádí jako „ER Low Positive“. Mnoho nálezů uvádí procento a intenzitu se skóre Allred nebo H-score, nebo bez nich.
- Jedna intenzita pro celý nádor: skóre intenzity je průměr, takže ze směsi slabě a silně obarvených buněk se stane „střední“. Pokud záleží na rozložení intenzit, použijte H-score.
- Další markery: ve výzkumu se skóre někdy přebírá pro jiné jaderné markery. Uveďte, že jste tak učinili, a jakou hranici jste použili.
Stejné skóre pomocí softwaru
Software pro analýzu obrazu dospívá k těmto skóre stejným výpočtem, jen oko nahrazuje měření. Najde každé jádro v oblasti, barevnou dekonvolucí oddělí hnědé barvivo DAB od modrého hematoxylinu, změří průměrnou optickou denzitu DAB každého jádra a ohodnotí ho podle prahů, které nastavíte: jeden práh pro pozitivní či negativní, tři pro 1+, 2+ a 3+.
- QuPath (zdarma, open source): Positive cell detection s jedním prahem dává procento pozitivních; se třemi prahy uvádí také H-score.
- Fiji / ImageJ (zdarma): Colour Deconvolution s vektory H DAB, pak prahování a počítání; výpočet skóre je na vás.
- SlideScope: spočítá jádra v oblasti, kterou zvolíte, každé ohodnotí a uvede procento pozitivních, H-score a skóre Allred najednou, podle stejných definic jako QuPath. Můžete se také zeptat běžným jazykem pomocí Ask Your Slide; každé číslo pochází z místního nástroje, s obrysy ke kontrole. Pouze pro výzkumné účely.
Ať použijete cokoli, prahy jsou vaše volba: zapište je do metod, porovnejte obrysy se snímkem a u preparátů, které srovnáváte, je ponechte stejné. Krok za krokem: jak kvantifikovat barvení IHC.
Otázky
Jak se počítá skóre Allred?
Sečtěte skóre podílu (0 až 5, z procenta pozitivních buněk) a skóre intenzity (0 až 3, průměrná síla barvení pozitivních buněk). Při 40 % pozitivních buněk se střední intenzitou je skóre 4 + 2 = 6.
Jaký je rozsah skóre Allred?
0 až 8. Protože každá pozitivní buňka má alespoň slabé barvení, celkové skóre 1 nemůže nastat: možné součty jsou 0 a 2 až 8.
Co znamená skóre Allred 8?
Více než dvě třetiny buněk jsou pozitivní (skóre podílu 5) a jejich průměrné barvení je silné (skóre intenzity 3). Jde o nejvyšší možné skóre.
Jaké skóre Allred je pozitivní?
V původním popisu bylo celkové skóre 3 a vyšší pozitivní a 0 nebo 2 negativní. Současná doporučení ASCO/CAP pro karcinom prsu uvádějí procento pozitivních jader, přičemž 1 % a více se hodnotí jako pozitivní. Při péči o pacienty se řiďte aktuálním doporučením a laboratoří, která nález vydává.
Jaký je rozdíl mezi skóre Allred a H-score?
Skóre Allred používá pro všechny pozitivní buňky jednu průměrnou intenzitu a pohybuje se od 0 do 8. H-score váží procento buněk při každé intenzitě zvlášť a pohybuje se od 0 do 300, takže o smíšeném barvení zachovává více informací.
Je tato kalkulačka zdarma?
Ano. Běží ve vašem prohlížeči a nikam nic neposílá. SlideScope, desktopová aplikace pro mikroskopii a patologii od stejného týmu, je placená aplikace s bezplatnou knihovnou ukázek (všechny nástroje) a předplatným pro vlastní snímky.
Zdroje
- Allred DC, Harvey JM, Berardo M, Clark GM. Prognostic and predictive factors in breast cancer by immunohistochemical analysis. Mod Pathol 1998;11(2):155-168
- Allison KH et al. Estrogen and progesterone receptor testing in breast cancer: ASCO/CAP guideline update. Arch Pathol Lab Med 2020;144(5):545-563
- Dokumentace QuPath: klasifikace buněk a prahy intenzity
Tyto kalkulačky provádějí výpočty pro výzkum a výuku. Nejsou diagnostickým nástrojem: hodnocení pro péči o pacienty se řídí validovaným testem, aktuálním doporučením pro daný marker a úsudkem patologa.
Ohodnoťte preparát místo ručního počítání
SlideScope spočítá jádra v oblasti vašeho preparátu, každé ohodnotí podle barvení DAB a ve vašem počítači uvede procento pozitivních, H-score a skóre Allred s obrysy ke kontrole. Nebo napište otázku: Ask Your Slide spustí tytéž nástroje a ukáže doklady. Pouze pro výzkumné účely. Vyzkoušejte všechny nástroje zdarma na vestavěných ukázkách; pro otevírání vlastních snímků potřebujete předplatné. Už máte jasno? Předplaťte si ho.